Bescript One Step RT-PCR Kit
产品简介
Bescript One Step RT-PCR Kit是一种一步法反转录定量扩增的qPCR预混试剂盒,由反转录酶、RNA酶抑制剂、BesTaq DNA热启动酶、dNTPs、Mg2+以及相关缓冲液组成。使用本产品进行RT-qPCR反应,只需在此基础上再加入引物、探针、模板和**DEPC水即可。 特异性高:采用热启动酶可抑制非特异性反应,并保证多重反应的灵敏性。
产品详细信息
Bescript One Step RT-PCR Kit使用说明书
Item:V003 (100次×25μl体系/反应)
试剂盒组成 |
100次 |
One Step Probe Mix |
1000μl |
One Step Enzyme Mix |
500μl |
产品描述
Bescript One Step RT-PCR Kit是一种一步法反转录定量扩增的qPCR预混试剂盒,由反转录酶、RNA酶抑制剂、BesTaq DNA热启动酶、dNTPs、Mg2+以及相关缓冲液组成。使用本产品进行RT-qPCR反应,只需在此基础上再加入引物、探针、模板和**DEPC水即可。
n 特异性高:采用热启动酶可抑制非特异性反应,并保证多重反应的灵敏性。
n 灵敏度好:对HCV RNA检测灵敏度为:20IU/mL。
n 使用方便:RT和qPCR在同一管中连续进行,快速简便、无污染。
n 通用性好:兼容所有的荧光PCR仪。
储存条件
-20℃保存12个月,使用前充分溶解混匀。
短期使用可放4℃保存,避免反复冻融。
使用方法
1. 反应液配制
反应液成分 |
体积 |
终浓度 |
One Step Probe Mix |
10μl |
1× |
One Step Enzyme Mix |
5μl |
1× |
正向引物(10μM) |
0.5μl |
200nM |
反向引物(10μM) |
0.5μl |
200nM |
探针(10μM) |
0.25μl |
100nM |
模板 |
5μl |
|
总计 |
补ddH2O至25μl |
2. PCR循环条件的设定
步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
|
1 |
反转录 |
50℃ |
20min |
1 cycle |
2 |
预变性 |
95℃ |
5min |
1 cycle |
3 |
变性 |
95℃ |
10s |
40 cycles |
4 |
退火、延伸 |
60℃ |
45s |
|
步骤4收集荧光信号 |
3. 实验结果分析
根据扩增曲线的结果进行荧光定量PCR数据分析。
注意事项
1. 本制品不含内参ROX染料。
2. 请穿实验服并戴一次性手套操作。