二乙酰一肟分光光度法

　　1 原量

　　尿素与二乙酰一肟及安替比林反应呈现黄色，在波长460nm处有*大吸收峰。

　　2 仪器

　　2.1 25ml棕色具塞比色管

　　2.2 水浴

　　2.3 分光光度计

　　3 试剂

　　3.10.2%二乙酰一肟溶液：称取0.2g二乙酰一肟[CH3COC：(NOH)CH3]溶于10%乙酸中，并稀释至100ml，保存于棕色瓶备用。

　　3.20.2%安替比林溶液：称取0.2g安替经林(1，5-二甲基-2-苯-3-吡唑酮C6H5NN(CH3)C(CH3)：CHC：O)，溶于1+1硫酸中并用混酸稀释至100ml，棕色瓶中保存。(注：硫酸浓度大于1+1时，显色缓慢且操作不便。)

　　3.3尿素标准溶液：准确称取0.1000g尿素于小烧杯中，加少量纯水溶解后转入1000ml容量瓶中，加0.1ml氯仿并用纯水定容，此液每ml含0.1mg尿素。冷藏保存。

　　3.4尿素标准使用溶液，准确吸取尿素标准储备溶液10.00ml于100ml容量瓶中，用纯水定容，此液每ml含0.01mg尿素。

　　4 分析步骤

　　4.1吸取水样10ml(尿素含量在0.001～0.015mg范围内)于25ml棕色具塞试管中，另取棕色具塞试管加入尿素标准使用液0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5ml，并用纯水稀释至25ml。(注：显色后溶液遇光退色，故需用标色法)。

　　4.2 于上述各管加入1.0ml二乙酰—肟溶液，混均。再加安替比林溶液2.0ml，混匀。

　　4.3将上述试管在沸水浴中加热50min。取出并在流动的自来水中冷却2min。立即以纯水为对照，在460nm处，用1cm比色皿，测定各管吸光值(加热45～55min，呈*深色，若再延长时间吸光值下降)。

　　4.4 以浓度对照吸光值，制备标准曲线。以水样吸光值从曲线上查出尿素含量。

　　5 计算

　　C——水样中尿素浓度mg/L;

　　M——从曲线上查得的尿素含量，?g;

　　V——水样体积，ml。