膜过滤(微孔滤膜)在检验领域的应用(1)

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  在临床检验中的应用

  国内医疗单位,在生化检验中使用不同孔径的微孔滤膜分离蛋白质,可以选择性地截留血清或体液中各种不同分子量大小的蛋白质。该方法简便、经济、用量少,是临床检验和科研工作中一种方便的分离蛋白质方法;在微生物检验中能提高结核菌及痢疾杆菌的检出率;在**学检验中利用硝酸纤维素膜- EL ISA法可以检测HBcAg,方法是将待测血清中乙肝病毒颗粒先与抗HBc作用,形成较大的**复合物颗粒,经过滤浓集于NC膜上,然后在3mol/L NaCNS作用下裂解,暴露出HBcAg,与HRP - 抗HBc反应后显色,在此微孔滤膜起浓缩作用。

  微生物限度检查

  在检测75%乙醇溶液的微生物限度时,取一定量的75%乙醇溶液用孔径0. 45μm薄膜过滤,再用无菌生理盐水反复冲洗,在无菌状态下移至营养琼脂平板,同时以无菌生理盐水滤膜作阴性对照,在30℃条件下培养,观测结果。在检测含抑菌成分的药品微生物限度(**、霉菌酵母菌数)时,使用滤膜过滤法与洗脱法比较,结果洗脱法不能正确反映被检品染菌量,平均回收率仅为13% ,而滤膜过滤法能定量反映被检品的染菌量,平均回收率达97% ,且操作方便、步骤少。该法采用了陶瓦盖,所得菌落饱满、凸现,便于观察、计数和分类定性。

  在检测使用中**剂的微生物污染状况时,使用滤膜过滤法可去除抑菌物质,较真实的反映实际情况。在检测液体食品和饮料中**总数和大肠菌群数、酵母菌、霉菌时,采用滤膜过滤的方法,灵敏性、准确性较高,检出率高,可以代替平皿倾注法、多管发酵法。用滤膜过滤法在**培养过程中其代谢产物和拮抗物质不易横向扩散,有利于菌落的独立生长,避免菌落的迁延现象,排除了优势菌群的干扰,菌落易于分辨,提高了实验的准确性