维生素B族常用种类介绍

　　维生素b1被称为精神性的维生素，这是因为维生素B1对神经组织和精神状态有良好的影响;维生素B1的缺乏容易引起各种**病。富含维生素B1的食物包括：酵母、米糠、全麦、燕麦、花生、猪肉、大多数种类的蔬菜、麦麸、牛奶。

　　维生素B2进入人体后磷酸化，转变成磷酸核黄素及黄素腺嘌呤二核苷酸，与蛋白质结合成为一种调节氧化-还原过程的脱氢酶。脱氢酶是维持组织细胞呼吸的重要物质。缺乏它，体内的物质的代谢紊乱，出现口角炎、皮炎、舌炎、脂溢性皮炎、结膜炎和角膜炎等。富含维生素B2的食物：牛奶、动物肝脏与肾脏、酿造酵母、奶酪、绿叶蔬菜、鱼、蛋类。

　　维生素B6是机体内许多重要酶系统的辅酶，参与氨基酸的脱羧作用、色氨酸的合成、含硫氨基酸的代谢和不饱和脂肪酸的代谢等生理过程，是动物正常发育、**和酵母繁殖所必需的营养成分。缺乏维生素B6容易引起：贫血症、脂溢性皮肤炎、舌炎。富含维生素B6的食物：啤酒酵母、小麦麸、麦芽、动物肝脏与肾脏、大豆、美国甜瓜(cantaloupe)、甘蓝菜、废糖蜜(从原料中提炼砂 糖时所乘的糖蜜)、糙米、蛋、燕麦、花生、胡桃。

　　维生素B12是由内脏中的**合成的，而且维生素B12存在于一切以动物为来源的食物中。维生素B12很难被人体吸收。胃所分泌的一种物质是吸收维生素B12的必要因素。对维生素B12的吸收来说，钙也是必要的元素。维生素B12对身体制造红血球和保持**系统的功能也是必要的。维生素B12也已经用于**、疲劳、肝炎、**和癫痫等的**。维生素B12储存于肝脏中，但是很容易通过尿排除体外。维生素B12是很**的，而且没有副作用。维生素B12缺乏者常是老人和酗酒者。富含维生素B12的食物：动物肝脏、牛肉、猪肉、蛋、牛奶、奶酪等

荧光法定量测定维生素B2的含量

　　一、实验题目：荧光法定量测定维生素B2的含量

　　二、实验目的：

　　1.掌握标准曲线法定量分析维生素B2的基本原理。

　　2.了解荧光分光光度计的基本原理、结构及性能，掌握其基本操作。

　　三、仪器与试剂：

　　1.仪器

　　荧光分光光度计;石英皿：1cm;容量瓶：50mL。

　　2.试剂

　　维生素B2标准溶液(10.0μg/mL)：准确称取10.0000mg维生素B2置于100mL烧杯中，加1%乙酸溶液使其溶解，定量转移入1000mL容量瓶中，并用1%乙酸溶液稀释至刻度，摇匀，将溶液保存在冷暗处。1%乙酸溶液。

　　四、实验内容与步骤：

　　1.系列标准溶液的制备

　　取维生素B2标准溶液(10.0μg/mL)0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分别置于50mL的容量瓶中，各加入蒸馏水稀释至刻度，摇匀。待测。

　　2.待测样品溶液的制备

　　取维生素B2样品液2.0mL于25mL容量瓶，加水稀至刻度，摇匀，待测。

　　3.激发光谱和荧光发射光谱的绘制

　　分别设置λem=522.0nm为发射波长，在200~500nm范围内扫描，记录荧光发射强度和激发波长的关系曲线，便得到激发光谱。从激发光谱图上可找出其*大激发波长为λex=371.0nm。

　　设置λex为371.0nm，在400~600nm范围内扫描，记录发射强度与发射波长间的函数关系，便得到荧光发射光谱。从荧光发射光谱上可找出其*大荧光发射波长λem和荧光强度，比较不同激发波长下获得的*大荧光发射波长λem和荧光强度。

　　4.标准溶液及样品的荧光测定

　　将激发波长固定在371.0nm，荧光发射波长为522.0nm，测量上述系列标准维生素B2溶液的荧光发射强度。以溶液的荧光发射强度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，制作标准曲线。

　　在同样条件下测定未知溶液的荧光强度，并由标准曲线确定未知试样中维生素B2浓度，计算药片中维生素B2的含量。

　　五、数据记录与结果分析

　　1.激发光谱和荧光发射光谱绘制过程中实验数据记录如下：

　　2.标准溶液及待测溶液的浓度和荧光强度记录如下：

　　在λem=522.0nm为发射波长，200~500nm范围内扫描，得知*大激发波长为371.0nm，设置λex为371.0nm，在400~600nm范围内扫描，*大荧光发射波长为λem为522.0nm,荧光强度为156.1，将λem固定在522.0nm，λex固定为371.0nm，系列标准维生素B2的荧光发射强度制得的标准曲线相关系数为0.99905,线性关系良好标准曲线方程为：

　　可求得被测液的浓度为：

　　即原溶液浓度为：

　　Y= 6.244+ 305.16*X

　　R=0.99905

　　标准工作曲线的方程为Y= 6.244+ 305.16*X，相关系数为0.99905，线性关系较好。根据上述数据可得待测溶液浓度为0.31μg/mL。

维生素B12的定性定量检测

　　一、实验目的和要求

　　1. 掌握紫外可见分光光度计的结构及基本操作;

　　2. 掌握吸收曲线的绘制;

　　3. 掌握利用分光光度法进行定性鉴别及定量检测的方法。

　　二、实验原理

　　维生素B12的水溶液在278土1nm、3611土1nm、550土1nm三个波长处有较强吸收峰，壁纸根据其吸收光谱的形装和吸收峰的吸光度比值，可对维生素B12进行定性鉴别;采用吸光系数法，测量其在*大吸收波长的吸光度值，可计算样品中维生素B12的含量。

　　三、实验步骤

　　1、溶液配制

　　用加样器移取维生素B12注射液500μl，转移至10ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

　　2、吸光度、透射比及吸收曲线的绘制

　　用1cm比色皿，以蒸馏水作为参比溶液，测定所配置的维生素B12溶液在下列各个波长处的吸光度、透射比;在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并根据吸收曲线确定定性、定量分析。

　　四、实验数据处理

　　1、定性鉴别

　　根据中国药典规定，维生素B12的水溶液在3611土1nm、550土1nm波长的吸光的比值在3.15~3.45之间，表明样品为维生素B12，即为合格药品。

　　2、定量检测

　　根据浓度25μg/ml维生素B12的注射液在3611土1nm、550土1nm波长的吸光的比值，按照下列计算的维生素B12注射液含量，结果在90.0~110.0之间，表明维生素B12注射液含量合格;其中207维生素B12为在波长的吸收系数，20为稀释因子。

　　五、实验体会

　　1. 实验得到的数据偏小，可能是实验过程中存在着误差。误差可能存在于读数、维生素B12溶液移取过程、比色皿上有污渍水迹及其润洗、分光光度计的操作中。而多次重复，在同一波长所得吸光度值也不一样，与波长的调节有关。

　　2.在实验中，**次检测波长在548nm~552nm之间的吸光度值变化微小，数据不理想，当把调到380nm~1000nm后，**次试验结果明显比**好。在实验过程中，我们除了把实验操作规范化和熟练实验步骤外，还应细心观察，对我们所用的仪器要有相当的认知。

　　3.使用分光光度计之前，需要预热30分钟左右，而未放入比色皿时，必须将样品室仓盖打开，以免影响分光光度计的使用期限和灵敏度。