生物显微镜使用(操作)方法、维护保养与常见问题(故障)处理资料大全

　　一、生物显微镜使用(操作)方法

　　㈠准备工作：首先将显微镜的工作台擦干净，然后将要观察的标本和各种器具准备好。

　　㈡显微镜的使用

　　⒈取用：将显微镜从镜箱取出，取出时一手握镜臂，一手托底座将其轻放在离工作台边缘8-10厘米处，偏左的位置。

　　⒉低倍镜的使用

　　⑴对光：对光前，先安上合适的目镜(一般采用10×目镜)，将10×、40×、100×物镜按照顺时针安在物镜转换器上，逆时针转动转换器使10×物镜对准载物台中央的通光孔。从目镜中观察，同时调节反光镜或接通电源，直至视场明亮、均匀为止。

　　使用双目显微镜对双目镜宽度要进行调节，用推或拉的方法调节两目镜之间的距离，直到在两个目镜上双眼同时观察时，两个图形的视场正好完全重合，此时镜筒刻度盘上所示的数字，就是观察者两眼瞳孔之间的距离。

　　根据物镜的放大倍数调节聚光镜的高度，使用油镜时由于放大倍数大，镜像亮度小，需要较强的照明，需要将聚光镜升至*高处。

　　调节可变光阑(光圈)使聚光镜的镜口率与物镜的镜口率一致，才能充分发挥舞静的分辨率，方法为：将显微镜调整到工作状态后，从目镜筒中拔出目镜，一边观察(向拔出目镜的目镜筒里看)，一边缩小光阑，这时可看到缩小的光阑被物镜成的像，然后逐渐调大光阑，当光阑像的边缘与物镜通光孔黑圈的边缘一致时停止，这时的聚光镜镜口率与物镜镜口率就一致了。如显微镜可变光阑圆框上刻有表示口径的标尺，可调至物镜镜口率的80%，即物镜镜口率为0.65，则可变光阑的标尺调至0.65×80%=0.52即可。

　　⑵观察：将标本放置在载物台上，使标本对准通光孔正中，下降镜筒或升高载物台，并从侧面观察，使物镜下端和标本逐渐接近，但不能碰到盖玻片。从目镜观察，用粗准焦螺旋慢慢升起镜筒和下降载物台直到看到标本为至，再调节细准焦螺旋至物像清晰。

　　⒊高倍镜的观察

　　在低倍镜下，找到要进一步观察的部位，移至视野中心，再上升聚光镜、逆时针转动物镜转换器换上高倍镜。合格的显微镜操作距离是由低倍镜转换到高倍镜时刚好合用的，一般稍为调节一下细准焦螺旋即可看到清晰的物像。

　　⒋油镜的观察

　　在高倍镜下看到标本后，把需要进一步放大的部位移至视野中心。上升镜筒或下降载物台约1.5厘米。将物镜转离光轴，在盖玻片所要观察的部位上滴一滴香柏油，把光阑升至*大。换上油镜，小心调节粗准焦螺旋，使油镜慢慢下降或慢慢上升载物台，从侧面观察油镜下端与标本之间的距离，当油镜的下端开始触及油滴时即可停止。从目镜观察，调节细准焦螺旋，直至看清标本物像。

　　观察完毕，上升镜筒或下降载物台，将油镜转离光轴，用干的擦鏡纸轻轻地吸掉油镜和盖玻片上的油，再用浸湿二甲苯的擦鏡纸擦拭两三次，*后用干净的擦鏡纸再擦拭两三次。

　　㈢观察后的处理工作

　　清洁：显微镜上的污物(残物或灰尘)，用擦鏡纸擦干净，若擦不干净可蘸少许二甲苯进行擦拭。

　　显微镜各部分的放置：擦完后，把物镜转离光轴，把反光镜转到与载物台垂直的方向，以减少灰尘粘落上面，而后罩上鏡套，小心的放回鏡箱内，保存备用。

　　二、生物显微镜使用时应注意的事项

　　⒈轻拿轻放,切忌震动和暴力，否则会造成光轴偏斜而影响观察，而且光学玻璃也容易损坏。不可把显微镜放置在实验台的边缘,应放在距边缘10cm处,以免碰翻落地.

　　⒉由于物镜的螺丝口容易损伤，安装物镜时要特别小心，即先向左方倒转一小段，凹凸双方吻合后再向右方旋转，不要转的太紧，轻轻捻到头，再稍紧即可。

　　⒊鏡检标本应严格按照操作程序进行，观察时要从低倍镜开始，看清标本后再转用高倍镜、油镜。

　　⒋使用油镜时一定要在盖玻片上滴油后才能使用。油镜使用完后，应立即将镜头、盖玻片上的油擦干净，否则干后不易擦去，以致损伤镜头和标本。但应注意二甲苯用量不可过多，否则，物镜中的树胶溶解，透镜歪斜甚至脱落，盖玻片移动甚至连同标本一起融掉。

　　⒌持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方.不可用手摸光学玻璃部分，如需擦拭应严格按照光学部件擦拭办法。

　　⒍放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜.使用的盖玻片和载玻片不能过厚或过薄。标准的盖玻片为0.17±0.02毫米，载玻片为1.1±0.04毫米。过厚或过薄将会影响显微镜成像及观察。

　　7.不要随意取下目镜,以防止尘土落入物镜,也不要任意拆卸各种零件,以防损坏.

　　8.要养成两眼同时睁开观察的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图.

　　9.使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内,其步骤是:取下标本片,转动旋转器使镜头离开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内.*后填写使用登记表.(注:反光镜通常应垂直放,但有时因集光器没提至应有高度,镜台下降时会碰坏光圈,所以这里改为平放)

　　三、生物显微镜的维护和保养

　　㈠擦拭

　　⒈光学部分的擦拭

　　顺序：吸耳球吹――毛笔、刷子和羽毛轻刷――擦鏡纸轻擦——擦鏡纸蘸二甲苯轻擦。

　　镜头表面发霉和发雾可用擦鏡纸蘸少量酒精乙醚混合液(3：7)轻擦。内表面发霉和发雾，一般无法**，所以严防发生。

　　生物显微镜的镜片都是用精密加工过的光学玻璃片制成的，为了增加透光率，都需在光学玻璃片的两面涂上一层很薄的透光膜。这样透光率就可以达到97%—98%。这一层透光膜表面很平整光滑，且很暴一旦透光膜表面被擦伤留有痕迹，它的透光率就会受到很大影响。观察时会变得模糊不清。所以在擦拭镜片时，一定要用干净柔软的绸布或干净毛笔轻轻擦拭，若用擦镜纸擦拭则更要轻轻擦拭，以免损伤透光膜。

　　⒉机械部分的擦拭

　　用干净的软布擦拭，或用擦鏡纸蘸二甲苯轻擦，不得用酒精和乙醚，因为这些试剂会侵蚀油漆，容易把油漆擦掉。

　　㈡保养

　　生物显微镜要放置在干燥阴凉、无尘、无腐蚀的地方，防潮、防尘、防腐蚀、放热。使用后，要立即擦拭干净，用防尘透气罩罩好或放在箱子内。对于一些结构复杂，装配精密的零部件，如果没有—定的专业知识，一定的技能和专用工具，就不能擅自拆装，以免损坏零部件。

　　四、生物显微镜常见问题(故障)处理

　　㈠使用中常见问题、原因分析与解决方法 问 题原 因解 决 方 法

　　视野不亮调节反光镜对光源的角度

　　灯泡、光源变压器或保险管是否烧坏更换烧坏部件

　　视野照明不均匀聚光镜是否在光路中央的正确位置低倍镜下，关闭可变光阑，靠调中螺旋把光束调中

　　物镜是否转到光路中的正确位置转入正确位置

　　透镜上有无指纹或油渍擦鏡纸蘸二甲苯擦拭所有外露透镜

　　所有物镜均难以调焦目镜表面生霉更换目镜

　　细准焦螺旋是否调至极限改变起位置至可调范围中间

　　是否标本太厚，厚薄不均换较薄均匀清晰的标本

　　标本正面朝下

　　高倍镜和油镜难于调焦盖玻片厚度是否正确换标准盖玻片

　　聚光器是否处于正确位置和正确聚焦调节聚光镜位置和聚焦

　　利用合适的油镜浸没油镜检查

　　高倍镜和油镜下难于找到标本用低倍镜准确地把标本移到视野的中央，然后用高倍镜或油镜把标本调中

　　视野中所见到的图象有污物、霉斑或人工假象当转动目镜时鏡内霉斑或污物是否随之转动是清洁目镜

　　否清洁物镜

　　检查载玻片和盖玻片之间是否有气泡移去盖玻片重新封片

　　是否看到清晰黑**限的环状物存在小气泡

　　㈡常见故障排除

　　1.镜筒的自行下滑：这是生物显微镜经常发生的故障之一。对于轴套式结构的显微镜解决的办法可分两步进行。

　　**步：用双手分别握住两个粗调手轮，相对用力旋紧。看能否解决问题，若还不能解决问题，则要用专用的双柱板手把一个粗调手轮旋下，加一片摩擦片，手轮拧紧后，如果转动很费劲，则加的摩擦片太厚了，可调换一片薄的。以手轮转动不费力，镜筒上下移动轻松，而又不自行下滑为准。摩擦片可用废照相底片和小于1毫米厚的软塑料片用打孔器冲制。

　　**步：检查粗调手轮轴上的齿轮与镜筒身上的齿条啮合状态。镜筒的上下移动是由齿轮带动齿条来完成的。齿轮与齿条的*佳啮合状态在理论上讲是齿条的分度线与齿轮的分度圆相切。在这种状态下，齿轮转动轻松，并且对齿条的磨损*些现在有一种错误的做法，就是在齿条后加垫片，使齿条紧紧地压住齿轮来阻止镜筒的下滑。这时齿条的分度线与齿轮的分度圆相交，齿轮和齿条的齿尖都紧紧地顶住对方的齿根。当齿轮转动时，相互间会产生严重的磨削。由于齿条是铜质材料的，齿轮是钢质材料的。所以相互间的磨削，会把齿条上的牙齿磨损坏，齿轮和齿条上会产生许多铜屑。*后齿条会严重磨损而无法使用。因此千万不能用垫高齿条来阻止镜筒下滑。解决镜筒自行下滑的问题，只能用加大粗调手轮和偏心轴套间的摩擦力来实现。但有一种情况例外，那就是齿条的分度线与齿轮的分度圆相离。这时转动粗调手轮时，同样会产生空转打滑的现象，影响镜筒的上下移动。如果这通过调整粗调手轮的偏心轴套，无法调整齿轮与齿条的啮合距离。则只能在齿条后加垫适当的薄片来解决。加垫片调整好齿轮与齿条啮合距离的标准是：转动粗调手轮不费劲，但也不空转。

　　调整好距离后，在齿轮与齿条间加一些中性润滑脂。让镜筒上下移动几下即可以了。*后还须把偏心轴套上的两只压紧螺丝旋紧。不然的话，转动粗调手轮时，偏心轴套可能会跟着转动，而把齿条卡死，使镜简无法上下移动。这时如果转动粗调手轮力量过大的话，可能会损坏齿条和偏心轴套。在旋紧压紧螺丝后，如果发现偏心轴套还是跟着转的话。这是由于压紧螺丝的螺丝孔螺纹没有改好所造成的。因为厂家改螺纹是用机器改丝的，往往会有一到二牙螺纹没改到位。这时即使压紧螺丝也旋不到位，偏心轴套也就压不紧了。发现这种故障，只要用M3的丝攻把螺丝孔的螺纹攻穿就能解决问题。我用此方法彻底解决了我校30台生物显微镜偏心轴套跟转的问题。

　　把以上这些步骤都一一做好后，镜筒自行下滑问题基本上是彻底解决了。

　　2物镜转换器转动困难或定位失灵：转换器转动困难可能是固定螺丝太紧。使转动困难，并会损坏零件。太松，里面的轴承弹珠就会脱离轨道，挤在一起，同样使转动困难;另外弹珠很可能跑到外面来，弹珠的直径仅有一毫米，很容易遗失。固定螺丝的松紧程度以转换器在转动时轻松自如，垂直方向没有松动的间隙为准。调整好固定螺丝后，应随即把锁定螺丝锁紧。不然的话，转换器转动后，又会发生问题。

　　转换器定位失灵有时可能是定位**断裂或弹性变形而造成。一般只要更换**就行了。

　　3遮光器定位失灵：这可能是遮光器固定螺丝太松，定位弹珠逃出定位孔造成。只要把弹珠放回定位孔内，旋紧固定螺丝就行了。如果旋紧后，遮光器转动困难，则需在遮光板与载物台间加一个垫圈。垫圈的厚薄以螺丝旋紧后，遮光器转动轻松，定位弹珠不外逃，遮光器定位正确为佳。

　　4镜架镜臀倾斜时固定不住：这是镜架和底座的连接螺丝松动所致。可用专用的双头板手或用尖咀钳卡住双眼螺母的两个孔眼用力旋紧即可。如旋紧后不解决问题，则需在螺母里加垫适当的垫片来解决。 5目镜、物镜的镜片被污染或霉变：大部分显微镜使用一段时间后都会产生镜片的外面被沾污或发生霉变。尤其是高倍物镜40x，在做《观察植物细胞的质壁分离与复原》实验时，极容易被糖液污染。如镜头被污染不及时清洗干净就会发生霉变。处理的办法是先用干净柔软的绸布蘸温水清洗掉糖液等污染物，后用干绸布擦干，再用长纤维脱脂棉蘸些镜头清洗液清洗，*后用吹风球吹干。要注意的是清洗液千万不能渗入到物镜镜片内部。因为为了达到所需要的放大倍数，高倍物镜的镜片，需要紧紧地胶接在一起。胶是透明的，且非常暴一旦这层胶被酒精、乙醚等溶剂溶解后，光线通过这两片镜片时，光路就会发生变化。观察效果会受到很大影响。所以在清洗时不要让酒精、乙醚等溶剂渗入到物镜镜片的内部。若是目镜、物镜镜头内部的镜片被污染或霉变，就必须拆开清洗。目镜可直接拧开拆下后进行清洗。但物镜的结构较复杂，镜片的叠放，各镜片间的距离都有非常严格的要求，精度也很高。生产厂家在装配时是经过**校正而定位的。所以拆开清洗干净后，必须严格按原样装配好。

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