二手高效液相色谱仪检测*** Waters2695+Waters2996

应用HPLC二手高效液相色谱仪检测***法对戒毒新药冰茶栓中***含量的测定方法，样品经1∶1的乙醚－石油醚溶化，用1∶1的甲醇水溶液提取，用20 mmol／l醋酸铵缓冲液和甲醇（80∶20）作为流动相，经ODS－C18柱分离，紫外270 nm检测，加标平均回收率为98．22％，相对标准偏差（CV）日内为0．30％，日间为0．97％，*低检出浓度为25μg／L，*低定量浓度为100μg／L，线性范围为10～250μg／mL，相关系数为0．999 9。
    关键词：二手高效液相色谱仪检测***；Waters2695+Waters2996；***。
    目前，常用的***含量测定方法有紫外分光光度法二手高效液相色谱仪检测***［HPLC］等。紫外分光光度法虽然简便、快速，但当样品中含有270 nm附近具有紫外吸收的杂质时，可产生较大的误差，使结果偏高；用高效液相色谱法测定各种饮料中的***已有许多报道，但冰茶栓作为一种新药，测定其中的***还未见报道。
　　冰茶栓为一种具有戒毒效果的复方栓剂，内含桂皮醛、***、冰片和微量蛇毒蛋白，本栓剂的填充剂为单甘酯，占总量的90％以上，而***只占总量的6％。本文的关键在于试样的前处理方法，要找到一种既能完全提取试样中的***，又能去除试样中的其他组分的方法。由于单甘酯不溶于水、甲醇、乙腈等强极性溶剂，易溶于乙醚、石油醚等弱极性溶剂中，而***正相反。根据该试样的实际情况，本文利用试样中各组分的极性差异，样品用乙醚－石油醚（1∶1）溶化后，再用1∶1的甲醇水溶液提取其中的***，用C18柱进行分离，用紫外检测器进行检测。文中对检出限和定量限、标准曲线、方法回收率、系统精密度、方法精密度及系统干扰性试验均作了验证。
1　试验部分
1．1　仪器与试剂
   二手高效液相色谱仪检测***，带Waters2996二极管阵列检测器；超声波清洗器。
　　试剂　乙醚（AR级）；石油醚（AR级，30～60℃）；甲醇（AR级）；重蒸水；***标准品。
1．2　色谱条件(二手高效液相色谱仪检测***)
　　色谱柱：C18柱，250mm×4．6 mm；流动相A：0．02 mol／L醋酸铵水溶液；B：甲醇。A∶B＝80∶20；流速：1 mL／min；检测波长：270 nm；进样量：20 uL；数据运行时间：20 min。
1．3　样品处理
　　准确称取试样一颗（约2．5 g）于150 mL的小烧杯中，加入100 mL的乙醚－石油醚（1∶1），于超声波振荡器中超声10 min，待试样溶化后，转入250 mL的分液漏斗中，用1∶1的甲醇水溶液150 mL分3次萃取，收集下层溶液于250 mL的容量瓶中，并用1∶1的甲醇水溶液定容至刻度。摇匀后分取5 mL该溶液于50 mL的容量瓶中，用水定容至刻度。过0．3μm的滤膜，取滤液进样。
2　结果与讨论
2．1　二手高效液相色谱仪检测******的检出限和定量限
　　将3倍于基线噪音的信号确认为峰，此时的溶液浓度为该组分的检出限。当峰高10倍于基线噪音且六次重复进样峰面积相对标准偏差（RSD）均小于10，此时的溶液浓度为该组分的*低定量限。以此为条件，将***标准品浓度以3倍信噪比浓度为起点，用流动相稀释至0．025μg／mL和0．10μg／mL，分别重复进样六次。

2．2　标准曲线的制作
　　二手高效液相色谱仪检测***分别吸取1．0 mg／mL的***标准储备液100，250，500，1 000，2 000，2 500μL于10 mL容量瓶中，用水定容至刻度。依次重复进样3次，得线性回归方程为Y＝5．42 X＋6．8，相关系数R＝0．998。标准色谱见图1。

2．3　方法回收率试验
　　称取2．66 g试样12份，在试样中加入相当于试样浓度的50％，70％，100％，120％，150％的***标准溶液，按照与试样相同的方法处理，在上述五点重复两次，取其平均浓度求得各点的平均回收率，平均回收率可达98．22％。
2．4　重现性的试验
2．4．1　系统精密度试验
　　制备试样一份，日内重复六次进样，日间重复六天进样。由表2可知，日内精密度为0．30％，日间精密度为0．97％，表明系统精密度良好。

2．4．2　二手高效液相色谱仪检测***方法精密度试验
　　重复取样五份，按上述方法处理试样后，依次进样，每份重复进样两针。测得样品中***的平均含量为55．45 mg／g，相对标准偏差为3．99。样品色谱图见图2。

2．5　二手高效液相色谱仪检测***方法选择性试验
　　取相当量的药栓填充物单甘酯，桂皮醛，蛇毒，冰片与试样相同方法处理，色谱图见图3。可见，这些成分对测定没有干扰。
3　小结
　　本方法适合于复杂样品中***的测定，操作简便，快速，灵敏度高。经验证，加标平均回收率为98．22％，变异系数（CV）日内为0．30％，日间为0．97％，*低检出限为25μg／L，*低定量限为100 ug／L，线性范围为10～250μg／mL，相关系数为0．999 9。
参考文献：国家标准GB／T16344—1996，二手高效液相色谱仪检测***。