微生物检测 系列之 金黄色葡萄球菌 测试片

1、原理及适用范围 
        金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 简称金葡菌)是人类*常见的致病菌之一，其侵袭力很强，能产生多种致病物质如：肠**、凝固酶等；可引起化脓性炎症、**性**及葡萄球菌性肠炎。金葡菌所引起的中毒事件已成为世界性的公共卫生问题，我国每年由金葡菌引起的食物中毒事件屡有报道。金黄色葡萄球菌测试(Filmplate^TMStaphylococcus aureus BT206) 含有选择性培养基和专一性的酶显色剂，运用微生物测试片专有技术，做成一次性快速检验产品，一步培养15～24h就可确认是否有病原菌的存在，大大地简化了检测程序。本产品适用于各类生、熟食制品，饮料，糕点类，调味品，奶制品等的快速检测。执行标准：食品***家标准食品微生物检验黄色葡萄球菌检验（GB/T 4789.10-2010）。
2、操作方法 
        2.1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL**磷酸盐缓冲液或生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，调节样品匀液pH至6.0～8.0。用1mL**吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液，以此类推，每次换一支吸管。
        2.2、接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，将金黄色葡萄球菌测试片（BT206）置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置10s左右，使培养基凝固，每个稀释度接种两片。做一片空白阴性对照。
        2.3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。

3、结果判读 
        培养后，测试片上紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌；呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本，*好用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的至少要再取样重复检验一次。
                                                                                                     

4、计数原则及报告方式 
       4.1、 选择菌落数在20～200个之间的纸片进行计数。
       4.2 、若两个稀释度的菌落数均在20～200之间，则取其平均菌落数乘以稀释倍数，即为每毫升（或每克）样品中金黄色葡萄球菌数。
       4.3、 如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于20，则计数稀释度*低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之；如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以*低稀释倍数报告之。
       4.4 如果所有稀释度的菌落数都大于200，计数*高稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于200的测试片时，也可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数，换算成单个方格内的菌落数后乘以20（滤纸区面积为20cm²），即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL（或CFU/g）表示。

5、附加说明 
        5.1、本产品对于提高卫生行政监督部门应对**性食物中毒等突发性公共卫生事件的能力，具有重要的作用。 
        5.2、山东省**预防控制中心的验证结果表明，当金黄色葡萄球菌在0～9个菌落范围内时，测试片与血平板均能检出，作为致病菌不得检出的标准要求，可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。
        5.3、经试验，该测试片的检测灵敏度高，特异性强，重复性好。对纯菌的检测下限可达3cfu／mL，与营养琼脂计数、Baird-Parker培养计数和显色培养基计数比较，检测结果均无显著差异。（食品研究与开发2009，30（1）：94-97）
        5.4、注意使用过的测试片上带有活菌，需及时按照生物**废弃物处理原则进行处理。

6、保存条件
       本产品需存放在4℃～10℃冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水，*好在拆封前将整包回温至室温。