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代做实验-RT-PCR/荧光定量PCR结果分析

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产品型号：
品 牌：biovol
公司名称：上海拜沃生物科技有限公司
所 在 地：上海杨浦
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产品简介

代做实验-RT-PCR/荧光定量PCR结果分析：RT- PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）即逆转录PCR，是将RNA的逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应（PCR）相结合的技术。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞组织中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。

产品详细信息

代做实验-RT-PCR/荧光定量PCR结果分析
real time pcr结果分析
Delta Cq ，Cq mean都是在设置的时候必须做的，哪几个孔是重复的，然后机器就会算。是看你的加样误差。
分析的时候只看一个，就是Ct (Cq) 值。先把内参的Cq值的平均数相减（假设你同一个样本一次做了3个孔，就取3个孔的平均数），算出加样的差别。然后再把目标基因的Cq值相减，算出差别，再除以内参的差别，就得到目的基因的差别倍数。
统计学分析要等到你重复至少3次以上完全独立的试验，再做PCR后算出差异倍数，才能做。不然统计的是你的加样误差和机器的分析误差，没有任何意义。
荧光定量PCR结果分析
如果有标准曲线，按照标准曲线计算。
一般都是相对量。则用delta delta CT方法来计算。举例如下：
对照组基因A的CT值为20， 内参（比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18，内参CT值14。
首先算加样量：delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说实验组的加样量是对照组的2倍。
基因A: delta CT=20-18=2。2的2次方是4。也就是说基因A的量在实验组是对照组的4倍。但是由于加样量是2倍，所以4处以2=2，*后的相对量是2倍。
 
几点注意：
1。必须确定扩增的特异性
2。 只有相同目标的CT值才能相减（扩增效率有可能不同）
3。 2的某次方只是理论值，实际扩增效率低于2。
4。 *好不用Syber Green
 
代做实验-RT-PCR/荧光定量PCR结果分析
上海拜沃生物科技有限公司提供实验外包-RT-PCR实验服务，详情咨询。
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