1.原理

      骨组织不同于一般的软组织，它是一种坚硬的结缔组织，有骨基质和骨细胞组成。骨基质是由有机物质和无机物质紧密结合而成，主要成分有由粘多糖和一些胶原纤维样骨胶纤维构成的骨样组织和沉着于其中的无机盐（骨盐）形成。无机盐以羟基磷灰石结晶的形式存在，其中绝大部分为水合磷酸钙，此外还包括微量碳酸盐和柠檬酸盐等。因此骨和其它一些已经钙化的组织在脱水、透明等制片前必需将组织中的钙盐用脱钙剂除去，才能制成4~5 um厚的切片。目前，常用的脱钙剂有单纯酸类、混合酸类、螯合剂、离子交换树脂和电解脱钙等方法。

（1）取材

    样本如股骨头、牙齿、病变骨、碎骨组织等，针对不同的样本采用骨钳或骨锯将其锯成厚度不超过0.5 cm的骨片，剥去骨组织周围的软组织。

（2）固定

    将处理好的骨片放入固定液中固定12－24 h。

（3）脱钙

     样本固定好之后，将其放入脱钙液中脱钙一定时间，时间依据脱钙液和标本而定。

（4）脱钙结束

    用细针轻刺可进入而不感到阻力，判定脱钙结束。脱钙后的组织经流水冲洗后，行常规石蜡切片。

（1）脱钙时间应根据所用的脱钙剂不同种类，不同骨组织、骨密质、骨松质和组织快的大小等具体情况来确定脱钙时间。

（2）骨组织取材不宜过厚，一般应在5 mm左右，以免脱钙时间过长造成组织形态结构破坏和染色效果不佳。

（3）脱钙容器不能使用金属制品，而且脱钙液的用量要充足，一般为标本的20－30倍，其中更换新液1－2次。

（4）骨组织一般应先固定后脱钙，或脱钙固定同时进行，未经固定的骨组织不宜脱钙，且脱钙液也不宜加温。

注意脱钙终点的判定，其方法主要有物理检测、X线照相技术和化学检测法。

1.新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上；

2.取材切面要平整，厚度不宜超过2mm；

3.请明确拍照部位及拍照倍数(一般为40X、100X、200X、400X)。

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