人骨碱性磷酸酶酶免试剂盒 E0900100480
产品简介
使用前彻底阅读说明书。BALP是碱性磷酸酶（ALP）的同功酶，由成骨细胞合成，当小儿体内维生素D缺乏，骨钙化不足时，该细胞活跃，BALP活性升高；当成骨细胞转化为骨细胞时，其活性逐渐降低。因此BALP能直接反映成骨细胞的活跃程度，而不受其他脏器来源的ALP影响，因此对佝偻病的诊断具有较好的辅助作用。所提供的ELISA Kit能测量人BALP含量，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
产品详细信息
Human-Bone Alkaline Phosphatase ELISA KiT
人骨碱性磷酸酶
产品编号：E
概述
使用前彻底阅读说明书。BALP是碱性磷酸酶（ALP）的
同功酶，由成骨细胞合成，当小儿体内维生素D缺乏，骨
钙化不足时，该细胞活跃，BALP活性升高；当成骨细胞
转化为骨细胞时，其活性逐渐降低。因此BALP能直接反
映成骨细胞的活跃程度，而不受其他脏器来源的ALP影
响，因此对佝偻病的诊断具有较好的辅助作用。所提供的
ELISA Kit能测量人BALP含量，只能用于研究用途，不
得用于医学诊断。
工作原理
所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联**吸附测定
试剂盒（ELISA）。包被抗BALP 抗体的微孔与待测样本
和酶联亲和物一起温育反应，使得酶联亲和物通过BALP
抗原结合在微孔上，形成抗体、抗原、抗体复合物。反应
后冲洗掉未结合的部分，再加入酶底物反应，底物在酶的
作用下变为蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。通
过测定吸光度来计算待测样本中的BALP含量。
试剂盒组分
需要而未提供的试剂和器材
1． 37℃恒温箱。
2． 标准规格酶标仪。
3． 自动洗板机。
4． 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。
5． 蒸馏水，容量瓶等
6． 干净的试管
注意事项
1． 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟；
2． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试
管；
3． 本试剂盒中不含有传染性试剂，仅供科研体外诊断
使用；
4． 有效期内使用，不可混用不同批号的试剂及包被微
孔板；
5． 试验过程中必须充分混匀；
6． 冲洗过程中必须冲洗充分、扣干，否则将影响结果
**度；
7． 包被微孔板必须干燥保存，避免受潮；
8． 试验完毕后，将剩余试剂放置2-8℃保存；
9． 试验过程中必须严格按照说明书进行操作，顺序不
得颠倒；
10． 大量样本操作时，应注意加样时间，避免加样缓慢
或间隔时间过长；
11． 储存和使用显**液时应避光；
12． 试验过程中，室温应始终保持在18-28℃；
材料96 test / 48 test
已稀释完的标准品1ml×6瓶
预包被抗体的微孔板96T（一块）/48T（一块）
酶联亲和物6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
显色液A 6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
显色液B 6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
终止液6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
ELISA专用洗涤液50ml×1瓶/ 25ml×1瓶
【1:10倍蒸馏水稀释】
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几
层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；重复此过程5次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正
式实验过程中。
样品的准备和保存
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存（-20℃），且避
免反复冻融。
血清——用干净试管收集血液后尽快将血清和红细胞通
过离心分离，收集血清。若短时间内分析，可存放在2-8
℃。
细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀，立即分析
或分装后-20℃冷冻保存。
本试剂盒提供的标准品及其他组份为方便用户使用均为
已按照试验标准稀释过的。
正常情况下所绘制的标准
曲线应为自下向上的一条
抛物线。
操作程序
1． 试验前将试剂盒及待测标本放置室温平衡（18-
28℃）并确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板
孔数目。
2． 将标准品各100μl依次加入一排孔中，处理后的标
本按100ul每孔加入，并做好标记。
3． 在标准品孔及待测样本孔中分别加入50μl酶联亲
和物，充分混匀。
4． 37℃温育60分钟后充分弃尽各孔内液体，用稀释
好的洗涤液反复冲洗5次并扣干孔内剩余水份。
5． 每孔依照次序，分别加入显色液A、显色液B各
50μl，充分混匀，在室温下避光反应15分钟。
6． 反应过后（正常情况下应为蓝色并带有明显的梯
度）每孔加入终止液50μl，充分混匀（正常情况下
应转变为黄色），终止反应。
7． 用酶标仪在450nm测定O.D.值。
结果计算
1. 分别计算各标准品及待测样本的平均吸光度数值
2. 以标准品浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标在普通
坐标纸上绘制标准曲线图
3. 在标准曲线图上根据待测样本的吸光度值查找其对
应的浓度范围
标准品
1.2 U
6 U
24 U
60 U
120 U
240 U
操作程序总结：
准备试剂，样品和标准品
加入准备好的样品、标准品以及酶联亲和物，37℃温育
反应60分钟
洗板5次，加入显色液A/B室温避光反应15分钟
加入终止液，终止反应
30分钟之内读O.D值
计算标本待测因子含量
检测范围：1.2U/L→240U/L
敏感性： ＜0.3U/L
特异性： 系统和其它细胞因子无交叉反应。
有效期： 6个月（2→8℃保存）
检测介质：血浆或血清、体液
重要说明：
1. 如试验需要做空白对照孔，则需先预留一个孔并做好
标记，但孔内不能加入任何样本。随标准孔和待测样本孔
一起温育。显色过程显色液A、B以及终止液都照常按说
明书要求去做，清洗过程也照旧，但切记要清洗充分。然
后在450nm下读取O.D值即可。
2. 清洗过程一定要充分彻底，否则会影响精度对结果造
成一定程度的影响。
REFERENCES
1. Gewert, D.R.et al.(1987) EMBO J. 6:651.
2. Docherty,A.J.P.et al.(1985) Nature 318:66.
3. Tanaka, T.et al. (1992) Mol. Cell. Endocrinol.
83:65.
4. Zeiss, C.J.et al.(1998) Gene 225:67.
5. Cook, T.F.et al.(1994) Arch. Biochem. Biophys.
311:313.
6. Wu, I. and M.A. Moses (1996) Gene 168:243.
7. Kouwenhoven,M.et al.(2002) J. Neuroimmunol.
126:161.
8. Arihiro, S.et al. (2001) Histopathology 39:50.
9. Maquoi, E.et al. (2002) Diabetes 51:1093.
人骨碱性磷酸酶
产品编号：E
概述
使用前彻底阅读说明书。BALP是碱性磷酸酶（ALP）的
同功酶，由成骨细胞合成，当小儿体内维生素D缺乏，骨
钙化不足时，该细胞活跃，BALP活性升高；当成骨细胞
转化为骨细胞时，其活性逐渐降低。因此BALP能直接反
映成骨细胞的活跃程度，而不受其他脏器来源的ALP影
响，因此对佝偻病的诊断具有较好的辅助作用。所提供的
ELISA Kit能测量人BALP含量，只能用于研究用途，不
得用于医学诊断。
工作原理
所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联**吸附测定
试剂盒（ELISA）。包被抗BALP 抗体的微孔与待测样本
和酶联亲和物一起温育反应，使得酶联亲和物通过BALP
抗原结合在微孔上，形成抗体、抗原、抗体复合物。反应
后冲洗掉未结合的部分，再加入酶底物反应，底物在酶的
作用下变为蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。通
过测定吸光度来计算待测样本中的BALP含量。
试剂盒组分
需要而未提供的试剂和器材
1． 37℃恒温箱。
2． 标准规格酶标仪。
3． 自动洗板机。
4． 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。
5． 蒸馏水，容量瓶等
6． 干净的试管
注意事项
1． 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟；
2． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试
管；
3． 本试剂盒中不含有传染性试剂，仅供科研体外诊断
使用；
4． 有效期内使用，不可混用不同批号的试剂及包被微
孔板；
5． 试验过程中必须充分混匀；
6． 冲洗过程中必须冲洗充分、扣干，否则将影响结果
**度；
7． 包被微孔板必须干燥保存，避免受潮；
8． 试验完毕后，将剩余试剂放置2-8℃保存；
9． 试验过程中必须严格按照说明书进行操作，顺序不
得颠倒；
10． 大量样本操作时，应注意加样时间，避免加样缓慢
或间隔时间过长；
11． 储存和使用显**液时应避光；
12． 试验过程中，室温应始终保持在18-28℃；
材料96 test / 48 test
已稀释完的标准品1ml×6瓶
预包被抗体的微孔板96T（一块）/48T（一块）
酶联亲和物6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
显色液A 6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
显色液B 6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
终止液6ml×1瓶/ 3ml×1瓶
ELISA专用洗涤液50ml×1瓶/ 25ml×1瓶
【1:10倍蒸馏水稀释】
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几
层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；重复此过程5次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正
式实验过程中。
样品的准备和保存
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存（-20℃），且避
免反复冻融。
血清——用干净试管收集血液后尽快将血清和红细胞通
过离心分离，收集血清。若短时间内分析，可存放在2-8
℃。
细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀，立即分析
或分装后-20℃冷冻保存。
本试剂盒提供的标准品及其他组份为方便用户使用均为
已按照试验标准稀释过的。
正常情况下所绘制的标准
曲线应为自下向上的一条
抛物线。
操作程序
1． 试验前将试剂盒及待测标本放置室温平衡（18-
28℃）并确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板
孔数目。
2． 将标准品各100μl依次加入一排孔中，处理后的标
本按100ul每孔加入，并做好标记。
3． 在标准品孔及待测样本孔中分别加入50μl酶联亲
和物，充分混匀。
4． 37℃温育60分钟后充分弃尽各孔内液体，用稀释
好的洗涤液反复冲洗5次并扣干孔内剩余水份。
5． 每孔依照次序，分别加入显色液A、显色液B各
50μl，充分混匀，在室温下避光反应15分钟。
6． 反应过后（正常情况下应为蓝色并带有明显的梯
度）每孔加入终止液50μl，充分混匀（正常情况下
应转变为黄色），终止反应。
7． 用酶标仪在450nm测定O.D.值。
结果计算
1. 分别计算各标准品及待测样本的平均吸光度数值
2. 以标准品浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标在普通
坐标纸上绘制标准曲线图
3. 在标准曲线图上根据待测样本的吸光度值查找其对
应的浓度范围
标准品
1.2 U
6 U
24 U
60 U
120 U
240 U
操作程序总结：
准备试剂，样品和标准品
加入准备好的样品、标准品以及酶联亲和物，37℃温育
反应60分钟
洗板5次，加入显色液A/B室温避光反应15分钟
加入终止液，终止反应
30分钟之内读O.D值
计算标本待测因子含量
检测范围：1.2U/L→240U/L
敏感性： ＜0.3U/L
特异性： 系统和其它细胞因子无交叉反应。
有效期： 6个月（2→8℃保存）
检测介质：血浆或血清、体液
重要说明：
1. 如试验需要做空白对照孔，则需先预留一个孔并做好
标记，但孔内不能加入任何样本。随标准孔和待测样本孔
一起温育。显色过程显色液A、B以及终止液都照常按说
明书要求去做，清洗过程也照旧，但切记要清洗充分。然
后在450nm下读取O.D值即可。
2. 清洗过程一定要充分彻底，否则会影响精度对结果造
成一定程度的影响。
REFERENCES
1. Gewert, D.R.et al.(1987) EMBO J. 6:651.
2. Docherty,A.J.P.et al.(1985) Nature 318:66.
3. Tanaka, T.et al. (1992) Mol. Cell. Endocrinol.
83:65.
4. Zeiss, C.J.et al.(1998) Gene 225:67.
5. Cook, T.F.et al.(1994) Arch. Biochem. Biophys.
311:313.
6. Wu, I. and M.A. Moses (1996) Gene 168:243.
7. Kouwenhoven,M.et al.(2002) J. Neuroimmunol.
126:161.
8. Arihiro, S.et al. (2001) Histopathology 39:50.
9. Maquoi, E.et al. (2002) Diabetes 51:1093.
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