CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷)) CHO/dhFr-
产品简介
CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。在没有HT(次黄嘌呤-胸腺嘧啶)时细胞会死亡。细胞培液中加氨甲喋呤可以防止对**低抗性的回变细胞的生长。冻存前12~24h,换新鲜培养基,使细胞一直处于对数生长期。细胞冻存后应取出一管复苏,检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存,CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养,观察细胞生长情况,再继续冻存。
产品详细信息
CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))
细胞名称:CHO/dhFr- 仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷)
组织来源:正常卵巢
培养条件:IMDM+10% FBS+0.1mM次黄嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+200nM氨甲喋呤
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:该细胞为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。在没有HT(次黄嘌呤-胸腺嘧啶)时细胞会死亡。细胞培液中加氨甲喋呤可以防止对**低抗性的回变细胞的生长。
CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))操作说明:
1)对于常温运输的细胞,收到细胞后,检查是否有运输问题,即细胞培养瓶或管是否破损,细胞培养液是否溢出。若没有运输问题,请75%酒精**后,保留封口膜,放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数:温度,湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后,细胞状态稳定后,即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系,CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许,培养的前三天内做细胞拍照记录,通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。
2)对于干冰运输的细胞,请取出冷冻管后,须立即放入37C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。然后将其复苏培养,次日更换培养液。
CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))注意事项:
1)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
2)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
3)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
CHO/dhFr-(仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷))下面介绍几种细胞培养过程中常见的污染:
一)杆菌污染:培养基中加入***可以减少此种污染,但也不是**的。
二)支原体污染:传说中的黑焦虫,长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。
三)***污染:似乎无处不在,而且顽固得很。长得暴快(12h就能在细胞上面密布)。培养液澄清。低倍显微镜下像黑色的沙子铺在细胞上,高倍镜下呈树枝状或葡萄状。
四)霉菌污染、比较常见的一种污染,常常来源于污染的空气、水和器械。