BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞 BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)
产品简介
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞是在大肠杆菌BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主,其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞经检测,本品无外源质粒DNA残留,转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。
产品详细信息
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞
产品描述
本品是在大肠杆菌BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主,其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。经检测,本品无外源质粒DNA残留,转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞
运输和保存方法
干冰运输。
BL21 (DE3)化学感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒≤-20℃保存。有效期半年。
注意事项
1)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞
2)待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。
4)为确保*高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
5)本品应于-80℃保存,请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6)为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞使用方法
1)将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化。
2)将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
3)42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,静置2-3分钟。
4)向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,37℃水浴锅中静置10分钟。
5)150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
6)2,500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞