长效期SDS-PAGE还原剂10mL

  长效期SDS-PAGE还原剂10mL

长效期SDS-PAGE还原剂10mL低于1.7，考虑RNA降解，*常见的原因是RNA酶去除不彻底。

建议你1.EP管和tip用DEPC水泡，如果来不及也可以买现成的。

2.提取时注意低温，防止RNA降解。

3.洗涤用的75％酒精用DEPC水配制，*后融解RNA的水也应是DEPC水，或去RNA酶水。

4.提取的RNA尽快转录成cDNA，－70度保存时间不宜过长（一般不超过一个月）。

长效期SDS-PAGE还原剂10mL提RNA提取秘诀：

1.提取RNA过程应该尽量快，不要太过仔细，以减少RNA的降解

2.在吸取上清液时要小心，离心管尽量不要抖动和倾斜，保持其从离心机里拿出来的角度吸取，加入异丙醇的那一步要尤其小心，上清液不要贪多

3.长效期SDS-PAGE还原剂10mL干燥时不要太过

4.你跑的电泳是不是普通的琼脂糖凝胶电泳？这个结果不是很准确，因为在跑胶的过程当中RNA也会降解，但并不一定你提取的RNA效果不好，一般情况下跑出来的电泳结果有3条带，2000bp,1000bp,100多的位置各有一条带，分别是28s，18s，5s，如果5S很亮，表示RNA降解

5.提完的RNA可以做反转录，长效期SDS-PAGE还原剂10mL然后用管家基因检测，只要能扩出明亮的条带即对你的实验没有影响。注意：在用管家基因检测时应增加循环数，以检测是否有DNA污染。