用于纯化甘精胰岛素的GH C8色谱填料
产品简介
关键词:甘精胰岛素;21A-Gly-30B a-L-Arg-30Bb-L-Arg-人胰岛素;GH C8色谱填料;绿百草科技 甘精胰岛素是一种在中性pH液中溶解度低的人胰岛素类似物。在本品酸性pH(pH4)注射液中,完全溶解。注入皮下组织后,因酸性溶液被中和而形成的微细沉积物可持续释放少量甘精胰岛素,从而产生得到预期可预见的、有长效作用的、平稳、无峰值的血药浓度/时间特性。
产品详细信息
化学名称:21A-Gly-30B a-L-Arg-30Bb-L-Arg-人胰岛素
分子式:C267H404N72O78S6
分子量:6063
其提纯方法如下:
发酵液(前体) |
上清液
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离心去掉细胞
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CQK30S
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磷酸调pH3.8
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乙酸铵洗脱
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上样量<50g/L
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结晶
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酶转化
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GH C8反相
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结晶
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甘精胰岛素成品(纯度>99%)
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GH C8(120孔径,10um粒径)柱子,10%乙腈-0.25M乙酸平衡,酶转化液1:5水稀释后上样,乙腈梯度洗脱,得到纯度94.5%的产品;上述样品稀释后,再上GH C8(同前),平衡液液为乙腈-0.2M乙酸钠(pH5.0),乙腈梯度洗脱,得到纯度为98.5%产品;上述样品1:3水稀释后,上GH C8(同前),平衡液为乙醇-0.05M乙酸,乙醇梯度洗脱,得到纯度为99%的甘精胰岛素纯品
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洗脱液加入0.5%的Phenol,4%的ZnCl2,NaOH调节pH为4.08,缓慢搅拌15min,转移到2-8度环境过夜,离心收集沉淀
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上步得到的样品加入柠檬酸、ZnCl2和调节pH得到结晶沉淀,冷水冲洗该沉淀物
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