Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 100U

Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 具有5’ → 3’DNA 聚合成活性和3’→ 5’ 外切核酸（校正）活性，是升级改进的Pyrococcus 类DNA 聚合酶，通过在其羧基端融合特殊 Enhancing Domain 蛋白，有效地提高了持续合成能力和抗逆性
产品货号： 
CED0031 
产品规格： 
100U 

Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 具有5’ → 3’DNA 聚合成活性和3’→ 5’ 外切核酸（校正）活性，是升级改进的Pyrococcus 类DNA 聚合酶，通过在其羧基端融合特殊 Enhancing Domain 蛋白，有效地提高了持续合成能力和抗逆性。使用10×Platinum HiProof Taq PCR Buffer 进行PCR 时，DNA合成的错配率约为1.2 x 10^-6 errors per nt per cycle，具备良好的保真性能，是目前保真率*高的DNA 聚合酶之一。Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield )，无末端脱氧核苷酸转移酶活性，PCR 产物末端为平末端。配合5×GC Buffer Ⅰ或 5×GC Buffer Ⅱ使用，可显著增强复杂二级结构DNA 模板以及高GC含量DNA 模板的扩增效果。较强的抗逆能力，能够以人血液为模板，直接扩增血液基因组DNA
产品特点
■ 热稳定性：94℃ 保持120 min 后仍具有50% 的活性；
■ 合成能力：催化5’ → 3’ DNA 合成，通过优化PCR 条件，以λ DNA 为模板*高可扩增10 kb DNA 条带；在配套的5×GC Buffer Ⅰ或 5×GC Buffer Ⅱ的协助下，Platinum HiProof Taq( HiGC & HiYield ) 能有效催化GC 含量高达85% 的DNA 模板的扩增；
■ 外切核酸活性：具备很高的3’ → 5’ 外切核酸（校正）活性，无可检测水平5’ → 3’ 核酸外切酶活性；
■ 高保真性：源自其3’ → 5’ 外切核酸（校正）活性以及特殊的增强肽段，该酶具有极高保真度，大约是普通Taq DNA Polymerase 的15 倍；
■dUTP、dITP 及包含这两种核苷酸的引物不能用于Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 参与的PCR。
■ 高扩增速度：扩增片段长度＜ 2 kb，Platinum HiProof Taq( HiGC & HiYield ) 的延伸速度为2 kb/min；＞ 2 kb 的片段，其延伸速度为0.5-1 kb/min。

应用
普通PCR、高保真PCR、复杂DN***段PCR、高GC含量模板PCR、平末端载体构建PCR、菌落PCR、定点突变PCR。

质量控制
■ 内切核酸酶检测：无可检测水平的内切核酸酶污染；
■ 热稳定性：37℃保持21 天酶活性无明显降低。

浓度
2 U/μL，100 U/管

来源
E.coli 表达重组Pyrococcus furiosus DNA 聚合酶基因。

储存条件
保存（运输）温度：-20℃

活性单位定义
1 个活性单位定义为70℃反应30 min，将10 nmol dNTPs合成多聚核苷酸（吸附于吸附柱DE-81）所需的酶量。
酶活性分析混合物：67 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl₂, 1 mM 2-
巯基乙醇, 50 mM NaCl, 0.1 mg/mL BSA, 0.75 mM 活化鲑精DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/mL [³H]-dTTP。

抑制和失活
■ 低浓度尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺和DMSO 对Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 酶活性无明显抑制作用；
■ 离子型去污剂脱氧胆酸钠(>0.06%)、十二烷基肌氨酸钠（>0.02%）、SDS(>0.01%)， 非离子型去污剂Tween20(>5%)、 Nonidet-P40 (>5%)、 Triton X-100 (>5% ) 对Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 酶活性具有抑制效果；
■ 酚/ 氯仿抽提可使Platinum HiProof Taq ( HiGC & HiYield ) 失活。

储存缓冲液
Storage Buffer
50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA,1 mM
dTT, 0.5%(v/v) Nonidet-P40, 0.5%(v/v) Tween-20, 50%(v/v)
Glycerol。
10×Platinum HiProof Taq PCR Buffer ( without Mg²⁺)
200 mM Tris-HCl (pH 8.8), 100 mM (NH₄)₂SO₄, 100 mM KCl,
1 mg/mL BSA, 1% (v/v) TritonX-100。