BCA蛋白定量试剂盒 编号: PW0104
产品简介
准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000 μg/mL,加强法可检测到5μg/mL。 快速:45分钟内可完成测定。 可在微孔板中进行。 干扰因素小。 不同蛋白质分子的变异系数远小于Bradford。 不受低浓度的EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类的干扰。 标准曲线接近直线,可以单点定标。
产品详细信息
说明
产品组分
组分
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规格
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Reagent A
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100 mL
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Reagent B
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2.5 mL
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Protein Standard (1mg/mL)
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5 x 1mL
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保存条件
蛋白标准贮藏在-20°C. 其它保存在4°C,有效期一年。
注意
·若发现试剂中有沉淀,可搅拌或在37°C 温育使其溶解,如发现**污染则应丢弃。
·高浓度的EDTA,EGTA,DTT,硫酸铵,脂类会影响检测结果,改用Bradford法测定。
·Reagent A和B应密封保存。
·Reagent A与Reagent B应密封保存。
·试剂具有腐蚀性,如接触皮肤眼睛等,请用大量水清洗,或就医。
操作步骤
1. 配置BCA工作液:根据标准品和样品数量,将Reagent A和Reagent B按照50:1的比例配置,充分混匀。该工作液室温下24小时内稳定。
2. 标准曲线绘制:
名称
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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Protein Standard(μL)
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0
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25
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50
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75
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100
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去离子水 (μL)
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100
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75
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50
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25
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0
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BCA工作液 (mL)
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2
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2
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2
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2
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2
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2
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样品 (μL)
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100
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混匀,在37°C放置30分钟,冷却到室温,测定A562的吸光度,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
3.样品和试剂的比可以按比例放大或缩小,微孔检测时,可以按比例缩小,但总体积不小于100 μL。
附注:
以下是不干扰本方法测定的物质浓度:
成分
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相容浓度
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成分
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相容浓度
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NP-40
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5.0%
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葡萄糖
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10 mM
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Emulgen
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1.0%
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EDTA
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10 mM
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Hepes
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100 mM
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Sodium Chloride
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1.0 M
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DTT
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1 mM
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NaOH
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0.1 M
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Guanidine.HCl
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4.0 M
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Ammonium Sulfate
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1.5 M
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Triton X-100
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5.0%
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乙酸钠 pH5.5
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200 mM
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辛基糖苷
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5.0%
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SDS
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5.0%
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Urea
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3.0 M
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Brij-35
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5.0%
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蔗糖
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40%
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Lubrol
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1.0%
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Glycine,pH 2.8
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100 mM
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CHAPS
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5.0%
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