微量热涌动仪

点击查看大图

产品价格： < 面议

产品型号：

品牌：Nano Temper

公司名称：广州盟欧仪器有限公司

所在地：广东广州

浏览次数：700 次

立即询价在线咨询

腾讯QQ
MSN

产品简介

☆ 快速**：10分钟测量解离常数、化学计量学、结合能
　☆ 高灵敏范围：从离子到复合物间作用（40Da-2.5MDa）

　☆ 天然的环境：在血清和裂解液中测量，研究膜表面受体

　☆ 样品使用量低：nM的浓度下只需<6ul样品量

　☆ 溶液测量：不需要固定到固相表面，无需纯化

　☆ 动力学范围：亚-nM和mM的解离常数

　☆ 极低消耗费、无维护费、简单易操作

产品详细信息

微量热泳动是粒子在微观的温度梯度中的定向运动。通过测量水化层的变化（通常是由生物分子结构/构象的变化引起的）而导致的微量热泳动的变化来确定亲和力。甚至像蛋白质磷酸化或小分子结合到靶标上这些微小的变化都可以被测量到。MST 也允许直接在溶液中测量分子间相互作用，而不需要一个固定的表面（无需固定）。MST是由总部设在慕尼黑的德国高科技公司NanoTemper技术有限公司发展出来的。

　微尺度热泳（MST）是一种新的方法，可以定量分析溶液中微升的分子间的相互作用。 MST是基于微量热泳动效应，即沿温度梯度定向的分子运动。一个空间的温度差ΔT导致分子浓度在温度升高的地区的变化，用Soret系数ST定义为：C热/ C冷= EXP（-STΔT）。

　热泳动取决于分子和溶剂之间的界面。在恒定的缓冲条件下，热泳动反映出分子大小，电荷和溶剂化熵。一个荧光标记分子A的热泳动由于大小、电荷和溶剂化熵的差异通常明显不同于分子A和靶标T形成的复合物AT。这种热泳动的区别可以用来通过梯度滴定实验，在一定缓冲条件下，测量计算出分子间的结合常数。

　测量荧光标记分子的热泳运动是通过监测毛细管内的荧光分布F。红外激光产生微观的温度梯度。溶液在激光光斑处的温度升高ΔT= 5 K，之前的红外激光是在同质化的荧光分布F是毛细管内观察到的冷切换。当红外激光打开后，两方面因素影响荧光的分布（热弛豫时间和荧光标记分子的热泳动），但是由于其时间尺度分离（热弛豫时间很短和荧光标记分子的热泳动时间较长），有利于我们测量荧光分布F热。在较慢的热泳动时间内（10秒），分子运动从局部加热区域移往四周的低温地区，中心区域的分子浓度降低，由于质量扩散效应的反作用，*后分子的分布直到达到一个稳定态。

　虽然质量扩散D的决定消耗的动力学，S T确定的稳态浓度比例下温度上升chot/ccold=exp(-ST ΔT) ≈ 1-ST ΔT。归一化荧光Fnorm = F热/ F冷主要是这个浓度比，除了温度跳跃∂F /∂T。的线性近似，我们发现：Fnorm = 1 +（∂F /∂TST）的温差。由于荧光强度的线性和热泳枯竭，Fnorm（A）未结合的分子归荧光和约束复杂的Fnorm（AT）线性叠加。表示x的绑定到目标分子的一小部分，在目标T滴定的荧光信号不断变化的计算公式如下：Fnorm=(1-x) Fnorm(A)+x Fnorm(AT)。

　定量绑定参数获得通过的约束力基板的连续稀释。通过绘制F 规范对系列稀释的不同浓度的对数，获得一个S形的结合曲线。这种结合曲线，可以直接安装质量作用定律的非线性解与解离常数K e，作为结果。微量热泳（MST）是一种分析生物分子的技术。