BCA蛋白浓度测定试剂盒 0123

产品价格: < 面议
产品型号:0123
 牌:国产
公司名称:上海硕嘉生物科技有限公司
  地:上海徐汇
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产品简介

上海硕嘉生物常年现货销售BCA蛋白浓度测定试剂盒,欢迎各方来电咨询订购。
我们的产品经过多年做实验成败的摸索、筛选、整合和实战检验,形成了多套实验效果好、实验条件非常稳定的经典反应体系。该体系推向市场后,受到了上海中科院、交通大学医学院、复旦大学医学院、仁济医院、中山医院、瑞金医院、新华医院等科研专家教授的一致肯定。优良、稳定的试剂效果口碑正在悄然相传。我们期待您对BCA蛋白浓度测定试剂盒的体验

产品详细信息

产品名称:

BCA蛋白浓度测定试剂盒

货号:

0123

规格:

500

单价:

288.00

详细介绍:

                                                                   BCA蛋白浓度测定试剂盒

产品简介:
蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。BCA(bicinchoninic acid)是理想的蛋白质定量方法;是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中,常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。该产品不受此影响,因此与之配合使用,可免除您实验中的许多烦恼。

包装清单:

产品编号

产品名称

包装

0123-1

BCA试剂 A

100ml

0123-2

BCA试剂 B

3ml

0123-3

蛋白标准(5mg/ml BSA)

1ml

说明书

1

保存条件:

BCA试剂 AB 4保存,蛋白标准品在-20保存,本试剂盒自订购之日起一年内有效。

基本原理:
      
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+ Cu+BCA试剂形成紫颜色的络合物,吸光度强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

使用说明:

试管法

1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂A1体积 BCA试剂B50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。

2.稀释标准品:将标准品储存液稀释至252000ug/ml

管号

稀释液体积

标准品体积

终浓度

A

360ul

240ul

2000ug/ml

B

280ul

120ul

1500ug/ml

C

300ul

300ul(A管取)

1000ug/ml

D

200ul

200ul(B管取)

750ug/ml

E

300ul

300ul(C管取)

500ug/ml

F

300ul

300ul(E管取)

250ug/ml

G

300ul

300ul(F管取)

125ug/ml

H

400ul

100ul(G管取)

25ug/ml

I

300ul

0ul

0ug/ml(空白)

3. 0.1ml的标准品和样本分别添加于测试管中。
4.各管加入2ml BCA工作液,37放置30分钟。(增加孵育时间和温度能够增加562nm的吸光度值和检测*低浓度,降低测量范围)
5.冷却到室温,(BCA不会达到真正的反应终止点,当冷却到室温时颜色依然会产生。但是在室温下颜色产生的效率非常低,在冷却后10分钟内测量完所有试管则无影响)用酶标仪测定A562,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

微孔板法

1.      配制工作液(同上)

2.      稀释标准品(同上)

3.      25ul的标准品和合适浓度范围的样本分别添加于96孔板的微孔中.

4.      各孔加入200ul BCA工作液,充分混匀。

5.      盖上96孔板盖,37孵育30分钟。

6.      冷却到室温,用酶标仪测定A562,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项:

1.  在低温条件或长期保存出现沉淀时,可搅拌或37温育或微波几十秒使溶解, 如发现细菌污染则应丢弃。

2. 样品中若含有EDTAEGTADTT、硫酸铵、脂类会影响检测结果,请试用Bradford蛋白浓度 测定试剂盒;高浓度的去垢剂也影响实验结果,可用TCA沉淀去除干扰物质。

3. 要得到更为**的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔且标准品与样品处理要尽量一样(如采用同样的溶液溶解样品和标准品), 每次均应做标准曲线。

4. 当试剂AB混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失。

5. 需准备37水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计,测定波长为540-595nm之间,562nm*佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时,试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

 


 

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