头孢类**属β-内酰胺类***，其**谱广，**效用强，临床上属于一线用药。该类**含量测定方法以高效液相色谱法居多，但各成一体，没有一个统一的规范。本实验采用了因子设计法，流动相采用醋酸盐缓冲液、乙腈，通过调整pH，以较少的实验建立了一个较为完善系统的高效液相色谱方法。应用该法不仅可以有效地同时分离所有的组分，且基本能够达到基线的分离，有较好的重现性。

1 仪器

岛津LC-10Atvp高效液相色谱仪;色谱柱：YWGC18(10μm4.6mm×250mm);检测波长：254nm;柱温：室温;流速：1.0mL/min ;进样量20μL。

2 试剂与试药

头孢噻肟、头孢羟氨苄、头孢克洛、头孢拉定、头孢哌酮、头孢氨苄、头孢唑林、头孢替唑、头孢他啶对照品(中国药品生物制品检定所)，头孢泊肟酯(市售)。

3 实验参数和指标

根据各国药典头孢类**含量测定的文献数据，以及实验目的我们选择了乙腈的3个浓度：8%，10%，12%;pH的3个值：3，4，7;反相离子氢氧化四丁基胺的有无设计了9种流动相系统. 流动相为：醋酸钠(1.36g→1000mL水)-乙腈(89：11)，用冰醋酸调节pH为3.0。各物质问分离度均能达到要求。

5 讨论

5.1从9次试验来看，pH值是影响头孢类**分离的一个重要因素，pH低时分离效果较好。当改变pH时，**在流动相中的电离度发生改变，从而改变了保留时间。因此，可通过调节流动相的pH值来调节溶质的电离度以达到调节溶质保留之目的，即“氢离子抑制色谱法”。

5.2头孢哌酮与其他头孢类**的性质差异较大，所以出峰时间较迟，k’较大，如果采用梯度洗脱，效果会更令人满意。