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动物细胞培养
细胞培养(cell culture)是指从体内组织取出细胞摹拟体内环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。 细胞培养 的培养物为单个细胞或细胞群。细胞培养技术也是生物技术中*核心、*基础的技术。
在医学遗传学研究中应用*广泛的是外周血**细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血** 细胞培养 具有时间短、技术简便、可重复取材等优点,它在临床染色体分析中使用*广泛。体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化,成为**细胞系,也可直接建成**细胞系,**细胞系能在体外无取制的传代和生长。**细胞系通常具有非整倍体细胞和各个细胞的核型不完全相同特征。但细胞 克隆 的细胞系其这一特征可以不明显。
动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
动物细胞培养工艺流程
图示:
动物细胞培养的条件:
①无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的***,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便**代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
②营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)
③血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)
④温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4)
⑤气体环境(95%的空气+5%CO 动物细胞培养2的混合气体),其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定。
单克隆抗体的制备
单克隆:由一个细胞通过有丝分裂形成一个细胞群。
单克隆抗体:由一个浆细胞通过有丝分裂形成一个细胞群,这个细胞群可以产生特异性抗体。
原理:利用了**,细胞融合,动物细胞培养等原理。
B**细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生**球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力,又具有产生特异性抗体的B**细胞的能力,将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。
单克隆抗体应用
1.作为诊断试剂:单克隆抗体在**的诊断,**及预防方面与常规抗体相比具有特异性强,灵敏度高的特点,优越性非常明显。
2.用于****和运载**:为**癌症,可在单克隆抗体上连接****,制成”生物导弹”将**定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞.
单克隆抗体意义
用于以下各种生命科学实验并具有医用价值
(1)沉淀反应:Precipitation reaction
(2)凝集实验:haemaglutination
(3)放射**学方法检测**复合物
(4) 流式细胞仪:用于细胞的分型和细胞分离。
(5)ELISA 等**学检测
(6)BIAcore biosensor:检测Ab-Ag或与蛋白的亲和力 。
(7) **印记(western blotting)
(8) **沉淀
(9) 亲和层析:分离蛋白质
(10) 磁珠分离细胞
(11)临床**的诊断和**
拜力推荐常用血清: 羔羊血清 , 供体牛血清 , 鸡血清 , 马血清 , 兔血清 , 猪血清 。
品名 | 货号 | 英文名 | 规格 | 品牌 | 供应商 |
Gibco羔羊血清 | 16070-096 | Lamb Serum | 500ml | GIBCO血清 | 拜 力生物 |
Gibco供体牛血清 | 16030-074 | Donor Bovine Serum | 500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco供体牛血清,加铁 | 10371-029 | Donor Bovine Serum, with Iron | 500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco鸡血清 | 16110-082 | Chicken Serum | 500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco马血清 | 16050-130/16050-122/16050-114 | Horse Serum | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco马血清,热灭活 | 26050-070/26050-088 | Horse Serum, Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco牛血清 | 16170-086/16170-078/16170-060 | Bovine Serum | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco牛血清,热灭活 | 26170-035/26170-043 | Bovine Serum, Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO血清 | 拜力 生物 |
Gibco山羊血清 | 16210-064/16210-072 | Goat Serum | 100ml/500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco兔血清 | 16120-099/16120-107 | Rabbit Serum | 100ml/500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco新生牛血清 | 16010-167/16010-142 | Newborn Calf Serum | 100ml/1000ml | GIBCO血清 | 拜 力生物 |
Gibco新生牛血清,优级 | 16010-159 | Newborn Bovine Serum,Qualified | 500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco新生小牛血清,热灭活 | 26010-066/26010-074 | Newborn Calf Serum, Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco猪血清 | 26250-084 | Porcine Serum | 500ml | IBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco Sf-900 II SFM (1X), liquid | 10902-096 | Sf-900 II SFM (1X), liquid | 500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco Sf-900 Medium (1.3X), liquid | 10967-032 | Sf-900 Medium (1.3X), liquid | 100ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco Sf-900™ III SFM (1X),liquid | 12658-019 | Sf-900™ III SFM (1X), liquid | 500ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
Gibco 血清 | Gibco 血清 | Gibco 血清 | 50ml/40*50ml | GIBCO血清 | 拜力生物 |
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