ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒) (以下简称ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)) :是酶**测定技术中应用*广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA(酶联**吸附试验, 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
自从Engvall和Perlman(1971)**报道建立ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays, ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒))以来,由于ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,使其得到迅速的发展和广泛应用 。尽管早期的ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)由于特异性不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着方法的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程方法制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)试验,都大大提高了ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)的特异性,加之电脑化程度极高的ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)检测仪的使用,使ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)更为简便实用和标准化,从而使其成为*广泛应用的检测方法之一。
目前ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)方法已被广泛应用于多种**和病毒等**的诊断。在动物检疫方面,ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。
试剂盒的类型
根据ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)所用的固相载体而区分为三大类型:一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒),即我们通常所指的ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)(微量板ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒));另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒),称为斑点ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)(Dot-ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒));再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒),称为布ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)(C-ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒))。在微量板ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)中,又根据其性质不同分为间接ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)、双抗体夹心ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)、双夹心ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)、竞争ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)、阻断ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)及抗体捕捉ELISA(酶联**吸附试验,酶联**试剂盒)。