维生素的测定

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点击量: 239477 来源: 科学实验仪器网

  一、维生素b1的测定

  VB1又叫硫胺素

  1、食品中VB1的存在形式

  ⑴ 常以游离态存在;

  ⑵复合脂形式存在(磷蛋白);

  ⑶ 辅羧酶形式存在

  VB1在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色的蔬菜和牛乳、蛋黄中比较丰富,动物组织不如植物含量丰富。

  2、VB1的性质

  ⑴ VB1在中性、碱性下不稳定,易分解;

  ⑵ VB1在酸性条件下稳定,即使加热酸性也稳定;

  ⑶ VB1为白色结晶,微溶于C2H5OH,不溶于乙醚或CHCl3,易溶于水。

  3、VB1的测定

  世界各国都用荧光法测定

  ⑴ 原理:硫胺素在碱性铁***溶液中,被氧化成一种兰色荧光物质,即为硫色素,在紫外光下,硫色素发出荧光。

  ⑵ 方法

  ① 萃取

  100g样品于干燥烧杯中,加入100ml0.1NH2SO4,打成匀浆,煮沸30分钟,称取一定的样品经高压锅121℃、20分钟高压酸解

  ② 水解

  在酸解的样品中冷却后加入含有10%糖化酶的10ml2.5MNaAC溶液,摇匀,用15%NaOH调PH=4.5,用淀粉酶使淀粉水解,也可用磷酸酶使淀粉水解,于50℃恒温箱中12小时

  ③ 纯化

  采用柱层析提纯

  吸附剂采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分数次洗涤,主要是把VB1吸附上去,吸附上去后,再用热水淋洗,*后用25%KCl-HAC把VB1洗脱下来,这样就得到纯VB1,再根据上面的原理在碱性下分析。

  ④ 分析

  装填柱子(离子交换柱)→ 提纯 → 氧化 → 测定