葛根为豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其葛根素的含量。

　　一、高效液相色谱法

　　2005版《中国药典》葛根含量测定项下：

　　色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(25：75)为流动相;检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不得低于4000。

　　供试品溶液的制备：取本品粉末约0.1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入30%乙醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　HPLC法测定葛根及其制剂中葛根素的含量时，使用*多的流动相系统为甲醇-水系统，另外还有甲醇-水，加醋酸调节pH等。

　　A：以甲醇-水为系统的，常见的比例及实验条件为：

　　①Waters2695/ 2996/ Empower 色谱系统;色谱柱Symmetry C18柱( 3.9mm×150mm, 5μm);流动相：甲醇-水(25：75);DAD检测波长254nm;柱温35℃。

　　②SP8800 型高效液相色谱泵;Hypersil ODS(4.6mm×250mm,5μm);流动相：甲醇-水(30：70);柱温40℃;检测波长250nm。

　　③Waters高效液相色谱仪;十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);甲醇-水(40：60)为流动相;检测波长为250nm;柱温30℃。

　　④美国Spectra-Physics 液相色谱仪;色谱柱Lunm C18(150mm×4.6mm, 5μm ) 不锈钢柱(美国Phenom enex公司);流动相为甲醇-水(28：72);检测波长250nm;柱温30℃。

　　B：乙腈-水系统：

　　①LC-10ATvp高效液相色谱仪;Hypersil ODS色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);乙腈-水(15：85)为流动相;检测波长250nm。

　　②TSP 高效液相色谱仪;色谱柱TurnerC18H37(5μm，4.6mm×150mm);流动相：乙醇-水(43：207);柱温30℃;检测波长250nm。

　　C：加酸调节的，如：

　　①LC-10A高效液相色谱仪;色谱柱为ODSC18柱(5μm，4.6mm×150mm);流动相为甲醇-水(35：65)，内含0.01%醋酸;柱温35℃;检测波长251nm。

　　②SP-8800高效液相色谱仪;色谱柱ODS-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相：甲醇-1.4%醋酸溶液( 22：78);柱温室温;测定波长: 250nm。

　　③美国Beckman公司高效液相色谱仪;HypersilODS柱(2.5μm，4.6mm×250mm);流动相为甲醇-氯仿-1.5%冰醋酸(22：1：77);检测波长250nm。

　　④SP1000 高效液相色谱泵;色谱柱YMCC18不锈钢柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相：甲醇-水醋酸(42∶100：0.2);检测波长250nm;柱温:室温。

　　其它如：吕竹芬等测定心血宁滴丸中葛根素的含量，采用高效液相色谱法，Dikma piamonsilC18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm)，以甲醇-乙腈-水(30：2：65)为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长250nm。

　　颜春华等测定脑得生片中葛根素的含量，采用日本岛津LC-4A高效液相色谱仪;色谱柱DiamonsilTM (钻石)C18(200mm×4.6mm,5μm);流动相：乙腈-甲醇-0.1%枸橼酸溶液(5：25：75);紫外检测波长250nm;柱温室温。

　　制备样品溶液时，一般以30%乙醇、50%乙醇、乙醇、甲醇、流动相或盐酸溶液(9→1000)等为溶剂，采用超声法提取。

　　二、其它

　　杨振林等测定葛根冲剂中葛根素含量，采用薄层- 紫外分光光度法，751GD型分光光度计(上海分析仪器总厂)。薄层层析硅胶G板,以氯仿-甲醇-水(7：28：0.2)为展开剂,在紫外灯(365nm)下定葛根素位置,刮下斑点,用甲醇洗脱,测定波长为251±1nm。

　　崔小兵等测定**颗粒剂中葛根素及阿魏酸的含量，采用双波长(λ1= 250nm,λ2=313nm) 梯度洗脱法。Waters 2690 型高效液相色谱仪;色谱柱KromasilC18柱(4.6mm×250mm，5μm);柱温为30℃,甲醇-1%醋酸水梯度洗脱;检测波长为250nm;柱温30℃。

　　方崇波等采用离子络合紫外分光光度法测定葛根素及其制剂的含量，采用UV4/2401紫外分光光度计(岛津)。方法：:在pH=4.0条件下,葛根素和Al3+形成络合物,在339.8nm波长处通过测定吸收度的改变来测定含量