一、 样品消化

　　1、 称取试样(根据样品含氮量)置于洗涤烘干的消化管内，加入催化剂和10ml硫酸。

　　2、将消化管分别放入消化架各个孔内，然后置于消化炉上，开启抽吸泵水阀，使抽吸泵处于吸气状态。接通电源，在加热初始阶段，需注意观测，防止试样因急沸而飞溅。(初化时，电压调至180V-200V温度不宜太高)。

　　二、 蒸馏

　　1、 用橡胶管连接NaOH、HO注入接口，冷却水接口和排水口。

　　2、按下蒸汽开关，蒸发炉内水由冷却水接口通过冷凝管，经平稳器慢慢流入，由于蒸发炉水位不断上升，使电极板之间电流逐步增加，水温经过电热板加热而上升，但由于初始时水温较低，水温迅速上升，蒸汽尚未能马上产生，电流急剧增加，造成熔丝管断裂。待电流表指向5A时即释放蒸汽开关，待指针回落到零时，再按蒸汽开关，反复几次，等蒸汽正常喷出，电流表固定在4-5A时，即开始正常蒸馏。

　　3、 在250ml三角烧瓶中加入2%硼酸50ml和2-3滴混合指示剂，将其套在蒸馏器的接收管上，并且让管口浸没在硼酸溶液中。

　　4、扳动蒸馏托盘架把需要蒸馏的消化管固定在蒸馏托盘上，通过面板开关分别向消化管注入蒸馏水和氢氧化钠溶液，然后开启蒸汽开关，向试管内注入蒸汽，进行蒸馏。待接收瓶液面高于150ml时将接收瓶下移，使接收管离开液面，用水冲洗出气口，继续蒸馏半分钟，然后取下接收瓶，带滴定。

　　三、 滴定

　　用0.1N HCl滴定接收瓶内的溶液，滴定溶液由绿色变成淡紫色时为止，记下消耗HCl的毫升数，按下式计算蛋白含量：

　　蛋白质含量(%)=(V-V0)N*0.014*A*100/W

　　式中：V—消耗盐酸的毫升数

　　V—空白试验时消耗盐酸的毫升数

　　N—盐酸的当量浓度

　　0.014—1ml盐酸的克当量数

　　A—固定系数(6.25，5.7等)

　　W—试样重量

　　(空白测定：用0.1克糖代替样品或不加样品作空白测定)

　　四、 注意事项

　　1、 消化时若有气体外溢，加大抽吸泵水的流速。

　　2、氢氧化钠溶液因长期不用，管里容易产生粘固现象，每次工作后把氢氧化钠外接皮管移入蒸馏水瓶内，抽洗几次，待下次使用时，在蒸馏时需排出100ml氢氧化钠，以防稀释，影响测定误差。

　　3、 每次蒸馏结束，必须迅速取下消化管，防止消化管液体倒吸至蒸发炉内腐蚀电极板。

　　4、 盛水和氢氧化钠的容器应低于仪器高度，防止泵停止工作后大气压把液体压入消化管