1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死(如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相)

　　2、对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。

　　3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。

　　维护知识问答

　　1、为什么溶剂和样品要过滤?

　　溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。)

　　色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。

　　仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。

　　2、HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕,并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。

　　3、流动相使用前为什么要脱气?

　　流动相使用前必须进行脱气处理，以除去其中溶解的气体(如O2)，以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时，因压力降低而产生气泡。气泡会增加基线的噪音，造成灵敏度下降，甚至无法分析。溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化，柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能。

　　4、常用的脱气方法比较：

　　氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。

　　加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。

　　抽真空脱气法：易抽走有机相。

　　超声脱气法：流动相放在超声波容器中，用超声波振荡10-15min，此法效果*差

　　5、如何防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞，以及堵塞后的处理?

　　溶剂的质量或污染以及藻类的生长会堵塞溶剂过滤器，从而影响泵的运行，尤其水溶液或磷酸盐缓冲液(PH=4—7)。以下几种方法可以有效防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞。

　　A：请严格执行溶剂过滤。

　　B：请勿使用多日存放的蒸馏水及磷酸盐缓冲液!

　　C：如果应用许可，可在溶剂中加入0.0001---0.001M的叠氮化钠.

　　D:在溶剂瓶内溶剂的上方小流量连续吹氩气,以隔绝空气。

　　E：避免使溶剂瓶暴露在直射阳光下，尽量使用琥珀色的溶剂瓶盛放水溶液或磷酸盐缓冲液。堵塞后的处理法方法：将过滤头从组件中取下，在浓硝酸(35%)中浸泡1h，然后用二次蒸馏水冲洗干净并超声处理。

　　6、泵如何维护?

　　泵给色谱柱提供稳定、无脉动、流量准确的流动相，及时合理的维护非常重要。A：流动相使用前请必须脱气、过滤。

　　B：使用缓冲盐时，关机前，用 100%的水冲洗系统20分钟，然后用有机溶剂冲洗系统10分钟(如甲醇)，然后关泵，(适于反相色谱柱)。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]

　　7、手动进样阀需做那些维护，使用时要注意什么?

　　对于手动进样器，当使用缓冲溶液后，或者进浓度差异比较大的样品时要用专用工具而不是用带针头的注射器冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。

　　注意事项：)

　　●安装时六通阀的5，6出口要与注射器在同一水平线上，以防止虹吸现象的发生，导致进样量的重复性变异。

　　●进样量的多少要根据定量管的LOOP体积决定。

　　当样品量少时：进样体积由注射器的进样体积决定，但*大进样体积要小于1/2loop体积。

　　当样品量较多时：进样体积由定量管的体积决定，为保证样品完全把定量管的流动相置换干净，需注射5—6倍的LOOP体积。

　　●要使用专用的液相注射器进样，**不可以用气相的注射器。