体外培养的细胞直接生活在培养基中，因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、**、渗透压、pH等诸多方面的要求。细胞培养的注意事项：
一、营养成分 维持细胞生长的营养条件一般包括以下几个方面： 1.氨基酸：是细胞合成蛋白质的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸，此外还需要谷氨酰胺，它在细胞代谢过程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的来源。 2.单糖：培养中的细胞可以进行有氧与无氧酵解，细胞对葡萄糖的吸收能力*高，半乳糖*低。体外培养动物细胞时，几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。 3.维生素：主要扮演辅酶、辅基的角色，必不可少。 4.无机离子与微量元素：细胞生长除需要钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素，还需要微量元素，如铁、锌、硒等。
二、促生长因子及** 各种**、生长因子对于维持细胞的功能、保持细胞的状态（分化或未分化）具有十分重要的作用。有些**对许多细胞生长有促生长作用，如胰岛素，它能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸。有些**对某一类细胞有明显促进作用，如氢化可的松可促进表皮细胞的生长等。
三、渗透压 细胞必须生活在等渗环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定耐受性。人血浆渗透压290mOsm/kg, 可视为培养人体细胞的理想渗透压。对于大多数哺乳动物细胞，渗透压在260－320mOsm/kg的范围都适宜。
四、pH值动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，pH值约在7.2-7.4在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强，二氧化碳不断被释放，培养液变酸，PH值发生变化。由于NaHCO3容易分解为二氧化碳，很不稳定，致使缓冲系统难以**地控制。合成培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统，并采用开放培养，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度（5％），与培养基中的NaHCO3处于平衡状态。
五、无毒、无污染的微环境 体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染（如**、**、支原体、病毒等）、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染（如抗体、补体）。
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