游离氨基酸样品前处理简要步骤

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点击量: 207861 来源: 上海仁特检测仪器有限公司
游离氨基酸样品前处理(固体)
1、匀浆或粉碎样品;
2、称取1g左右(或根据*终氨基酸浓度估算)样品, 用50ml 0.01N 盐酸浸提30min;
3、摇匀后过滤,准确吸取滤清液2ml 于离心试管中,加入8%磺基水杨酸2ml,混匀,静置15min;
4、3000rpm离心20min 或10000rpm离心10min;
5、取上清液,过0.45um或0.22um膜后上机;
游离氨基酸样品前处理(液体)
1、吸取约8ml 样品于离心试管中,3000rpm离心5min(达到分离固态物的目的即可);
2、准确吸取上清液1ml 于另外的离心试管中,加入2%磺基水杨酸9ml,混匀,静置15min;
3、3000rpm离心20min 或10000rpm离心10min;
4、取上清液,过0.45um或0.22um膜后上机;
注:
1、依据经验,磺基水杨酸*终浓度2%--5%蛋白沉淀****;
2、如果脂肪含量超过3%,沉淀蛋白前先用正己烷脱脂(摇匀静置,分层后弃上层,取下层);
3、*终上机液浓度应为每种氨基酸10nol/ml – 200nmol/ml;


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