五味子为木兰科植物五味子的干燥成熟果实,是临床常用中药。五味子含量测定方法包括:二阶导数紫外分光光度法、薄层色谱-比色法、薄层色谱-紫外分光光度法、薄层色谱、光密度法、高效液相色谱法等。下面我们介绍的是由LC-10ATVP高效液相色谱仪测定五味子含量的方法:
1)色谱条件色谱柱为DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相为甲醇-水(13∶7);流速1.0ml/min;柱温30℃;检测波长250nm。在此色谱条件下,五味子醇甲与其他杂质峰完全达到分离(R﹥1.5),理论板数按五味子醇甲峰计在2000以上。
2)对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品15mg,精密称定,置50ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每毫升含五味子醇甲0.3mg)。
3)供试品溶液的制备取本品粉末(过3号筛)约0.25g,精密称定,置20ml量瓶中,加甲醇约18ml超声处理20min,取出,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
4)检测分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,在250nm处检测。