中华人民共和国国家标准
实验动物微生物学检测方法
前言
本标准是对GB/T 14926.17-1994《实验动物绿脓杆菌检测方法》的修订。本标准增加了“6.3.5半固体动力试验”和“6.3.6 42℃生长试验”和“5检验程序”。因血清型鉴别试剂难得，且血清型鉴别只是必要时才采用，故删除原标准“5.6血清学试验”。氧化酶试验阳性是假单胞菌属的重要生化指标，且假单胞菌属中，产生绿色色素是绿脓杆菌的特征。因此，在NAC液体培养中，当有绿**素和菌膜产生时，通过革兰染色、氧化酶试验可直接判定结果。
本 标 准 由中华人民共和国科学技术部提出并归口。
本 标 准 起草单位:中国实验动物学会负责起草。
本 标 准 主要起草人:黄韧。
本 标 准 于1994年1月**发布口
中华人民共和国国家标准
GB/T 1492617-2001 实验动物绿脓杆菌检测方法
1 范围
本标准规定了实验动物绿脓杆菌的检测方法。
本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔绿脓杆菌的检测。
2 引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准*新版本的可能性。
GB /T 1 4926.42-2001 实验动物**学检测标本采集
GB /T 14926.43-2001 实验动物**学检测染色法、培养基和试剂
3 原理
绿 脓 杆 菌是革兰阴性杆菌，具有产生绿**素和氧化酶等生化试验特征，因此，可利用选择性培养基培养、菌体检验和生化试验进行鉴定。
4 主要设备和材料
4.1 普通恒温培养箱。
4.2 生物显微镜。
5 培养基和试剂
5.1 NAC液体培养基。
5.2 NAC琼脂平皿。
5.3 普通营养琼脂平皿。
5.4 糖发酵培养基。
5.5 西蒙氏柠檬酸盐培养基
5.6 尿素培养基。
5.7 营养明胶。
5.8 氧化酶试剂。
5.9 硝酸盐培养基。
6 检测程序
7 操作步骤
7.1 采样
采取回盲部内容物、粪便或病灶组织、分泌物。
7.2 分离培养
将已接种的NAC液体培养基置(36士1)c 培养18 24h 后观察生长情况，对未产生绿**素者转种NAC琼脂平皿，(36士1) C培养18 24 h
7.3 鉴定
7.3.1 生长特性及菌落特征
绿脓杆菌在NAC液体培养基中均匀混浊生长、有菌膜、大部分菌株可在培养液上半部形成绿**素;在NAC琼脂平皿上形成扁平，边缘不齐呈锯齿状，2-3 mm的菌落，大部分菌落可产生绿**素而致使培养基呈绿色，部分菌株需延长培养时间方可产生色素。
7.3.2 菌体特征
革兰阴性杆菌，菌体长短不一。
7.3.3 氧化酶试验阳性
被检菌为革兰阴性杆菌，氧化酶阳性及产生绿**素，可报告检出绿脓杆菌。
7.3.4 生化试验
对不产生绿**素的菌应做如下鉴定，见表1
表 1 绿脓杆菌的主要生化特性
7.3.5 半固体动力试验阳性。
7.3.6 42℃生长试验阳性。
8 结果报告
凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。
公安机关备案号：
