穿梭箱实验对不同实验条件的影响机制
本研究在考察实验条件对于KM鼠学习记忆影响的基础上,又考察了大鼠不同鼠种对学习记忆形成的差异。结果表明:对于同样的实验条件设置,两组的学习成绩相比差异具有显著性,Wistar大鼠较SD大鼠更易形成条件反射;考虑到鼠类昼伏夜行的生活习性,本研究又考察了训练时辰对于Wistar大鼠学习记忆的影响,结果表明:白天训练组与夜晚训练组的学习成绩比较,差异没有统计学意义,训练时辰对于Wistar大鼠的记忆获得没有影响。
对于记忆保持,本研究只考察了KM小鼠及Wistar大鼠训练达标(ROA>0.75)后间隔不同天数的记忆保持情况。在考察的时间间隔内,其学习与记忆成绩相比差异没有统计学意义,说明其记忆在获得后,相对稳定且能够保持较长一段时间。但其记忆到底能保持多久,还有待于今后进一步研究。SD大鼠在已知的实验条件下及规定的训练时间内没有达标,所以本研究未考察其记忆保持情况。
总之,大小鼠穿梭箱的训练成绩受诸多因素的影响。相同的实验条件设置,不同的鼠种、品系或者相同的品系,不同的实验条件设置均对大小鼠的学习记忆的形成产生较大影响。因此,实验者应因鼠而异,制订适宜的训练方案,使其尽快达到训练标准。实验仪器如图所示:
XR-XC105型
实验步骤
实验分为记忆获得和记忆保持两个阶段。实验开始时首先设定实验参数,包括**期(非条件刺激与条件刺激之间的间隔时间)、条件刺激(高频率的稳定声音刺激或者闪光灯强光刺激)时间、非条件刺激(电击)时间及强度、穿梭次数等。在记忆获得阶段首先把实验鼠放入左侧室,接近并面向端壁,适应5 min后开始训练。穿梭实验视频分析系统按照预先设定好的程序,先给一个可以察觉的条件刺激,持续一定时间后,如果实验鼠仍停留在同侧,则再给一个非条件刺激。动物受到电击后将从圆洞逃至对侧一定时间后,对侧再给予条件和非条件刺激,如此反复。每只鼠连续训练10 d,每天穿梭几十次。一次穿梭训练结束后,间隔一定
时间开始下一次训练。经过反复训练后,只给条件刺激,动物即逃到对侧**区以逃避电击,此即形成了条件反射或称主动回避反应。全部训练结束后,计算机显示出每次穿梭的轨迹,记录大(小)鼠的主动回避反应(active avoidance response,AAR,即动物在条件刺激后,非条件刺激到来之前就产生的穿梭)次数;被动回避反应(passive avoidance response,PAR,即实验鼠在非条件刺激后才产生的穿梭)次数;逃避失败(escape failure,EF,指实验鼠在条件刺
激和非条件刺激的过程中仍然停留在同侧箱中)次数。以AAR作为其学习记忆成绩的主要评价指标,并计算主动回避反应率(rate of AAR,ROA,即主动回避反应次数AAR占穿梭总数N的百分比),统计ROA>0.75(达标)的动物的百分比.
记忆获得实验
不同条件刺激和条件刺激时长对KM小鼠记忆获得的影响 KM 鼠32只,随机分为3组。SG5s组:11只,给予声光刺激5 S,**期5 S,交流电(0.3 mA)击5 S;G5s组:10只,给予光刺激5 S,**期5 S,交流电(0.3 mA)击5 S;G10s组:11只,给予光刺激10 S,**期5 S,交流电(0.3 mA)击5s。每组连续训练10 d,每天1次,每次穿梭3O次。训练成绩用AAR表示。统计训练10 d中动物的达标(ROA>0.75)百分率,比较训练d 7两组间动物AAR的差异。
鼠种对于大鼠记忆获得的影响 实验分2组,Wistar组:Wistar大鼠10只,给予声光刺激10 S,**期30 S,交流电(0.7 mA)击lOs;SD组:sD大鼠10只,刺激条件同Wistar组。每组连续训练10d,每天1次,每次穿梭20次。
记忆保持实验
KM小鼠记忆保持情况考察 KM小鼠70只,按照“1.4.1”中G10s组的实验条件连续训练14d,每天1次,每次穿梭30次。选取ROA>0.75的小鼠36只,用同样的训练方法再连续训练3 d。取其AAR的均值作为小鼠记忆获得成绩(0 day)。然后随机分为6组,每组6只,分别用于考察间隔2、4、6、11、14、21 d后记忆保持情况,以AAR作为记忆保持成绩评估指标。
训练时辰及鼠种对于大鼠记忆获得的影响