条件性恐惧实验测试方案
模型的制备:将大鼠放在动物饲养室内适应一周。饲养室内温度为24±0.5℃,湿度为60%,光:暗周期为12h:12h(光照时间为8:00-20:00),随机分笼单独饲养,自由进食、饮水。
A.条件性恐惧的建立:将大鼠分别放入斯金纳箱(箱子底部为铜条栅栏,可通电)内,适应2分钟后再给予单一频率声音信号(4.5KHZ,60dB,30S,该声音由美国Adobe公司的Adobe Audition2.0软件制作)适应4次(两次声音间隔1-4分钟),然后再给予6次以声音信号为提示的不可逃避足底电击(1mA,5s),声音与电击同时结束,两次声音间隔为1-4分钟,共28分钟。动物在被电击时发生惊叫、惊跳、逃避等,听到声音提示时出现慌张、逃避或者僵立行为(除呼吸外无其他运动行为),这样建成恐惧动物模型(以下简称建模)。实验结束后让动物在斯金纳箱内继续停留2分钟后放回饲养笼饲养。每次实验结束后用90%酒精擦拭箱底,用湿布擦拭箱壁,以避免残留气味对后续实验大鼠的影响。
B.恐惧消退训练:24h后将已经建立条件性恐惧的动物再次放入斯金纳箱内,仅给予声音信号16次,两次声音间隔为1-2分钟,共24分钟。恐惧对照组在对应的时间点放进斯金纳箱内24分钟,不进行消退训练(不给声音刺激)。
C.条件性恐惧消退保持测试:恐惧对照组和恐惧消退组(注:此时大鼠分为两组:恐惧消退组和对照组)分别在恐惧消退训练后的第1、3、7天将大鼠放在训练箱内,给予5次声音信号,时间间隔为0.5s,记录3分钟内的不僵立时间,计算3分钟内不僵立时间百分比,作为消退保持成绩。百分比越高,表明消退保持成绩越好。
需要记录的实验测试指标:
2)活动度相关:总实验时间、总距离(cm)、总平均速度(cm/s)、每个阶段的时间、距离及平均速度。
附:XR-XC404型恐惧记忆实验系统