速率区带离心法是根据被分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,离心后分别处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。梯度液在离心过程中以及离心完毕后,污泥脱水机取样时起着支持介质和稳定剂的作用,避免因污泥脱水机机械振动而引起已分层的粒子再混合,常用的梯度液Ficoll, Percoll及蔗糖。此离心法须严格控制离心时间,使得既能使各种粒子在介质梯度中形成区带,又要把时间控制在任一粒子达到沉淀前。若离心时间过长,所有的样品全部都到达离心管底部;若离心时间不足,则样品还没有分离。此法是一种不完全的沉降,沉降受物质本身大小的影响较大,因此一般是在物质大小相异而密度相同的情况下应用。临床实验室常用Percoll作分离溶液,用于静脉血中单个核细胞的分离。先把梯度液加入离心管中,溶液的密度从离心管顶部至底部逐渐增加(正梯度) 。将所需分离的样品小心的加至密度梯度溶液的顶部,样品在梯度溶液表面形成负梯度。
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