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实时荧光定量PCR的优势
实时荧光定量PCR的优势:
实时荧光定量PCR与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。实时荧光定量PCR由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。正常化后可以设定域值水平,这就是分析荧光数据的水平。样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。
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