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PCR定量荧光的工作原理
PCR定量荧光的工作原理
PCR扩增时在参入一对引物的同时参入单个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记单个报告荧光基团和单个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有单个荧光分子构成,实现了荧光信号的累积与PCR产物构成完全同步。
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