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水溶性维生素的测定
一、维生素
B
1
的测定
V
B1
又叫硫胺素
1
、食品中
V
B1
的存在形式
⑴
常以游离态存在;
⑵复合脂形式存在(磷蛋白);
⑶
辅羧酶形式存在
V
B1
在酵母、米糠、麦胚、花生、黄豆以及绿色的蔬菜和牛乳、蛋黄中比较丰富,动物组织不如植物含量丰富。
2
、
V
B1
的性质
⑴
V
B1
在中性、碱性下不稳定,易分解;
⑵
V
B1
在酸性条件下稳定,即使加热酸性也稳定;
⑶
V
B1
为白色结晶,微溶于
C
2
H
5
OH
,不溶于乙醚或
CHCl
3
,易溶于水。
3
、
V
B1
的测定
世界各国都用荧光法测定
⑴
原理:硫胺素在碱性铁***溶液中,被氧化成一种兰色荧光物质,即为硫色素,在紫外光
下,硫色素发出荧光。
⑵
方法
①
萃取
100g
样品于干燥烧杯中,加入
100ml0.1NH
2
SO
4
,打成匀浆,煮沸
30
分钟,称取一定的样品经高压锅
121
℃、
20
分钟高压酸解
②
水解
在酸解的样品中冷却后加入含有
10%
糖化酶的
10ml2.5MNaA
C
溶液,摇匀,用
15%NaOH
调
PH=4.5
,用淀粉酶使淀粉水解,也可用磷酸酶使淀粉水解,于
50
℃恒温箱中
12
小时
③
纯化
采用柱层析提纯
吸附剂采用的是人造浮石。人造浮石用
25%KCl
溶液分数次洗涤,主要是把
V
B1
吸附上去,吸附上去后,再用热水淋洗,*后用
25%KCl-HA
C
把
V
B1
洗脱下来,这样就得到纯
V
B1
,再根据上面的原理在碱性下分析。
④
分析
装填柱子(离子交换柱)→
提纯
→
氧化
→
测定
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