除少数培养基只需加热溶解,不需高压**外,大部分培养基均需121℃高压**15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基**不彻底,直接关系到试验结果。因此必须认真对高压**器进行**效果的验证。
1.试验材料
(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌,含芽胞量5-lO5 CFU/片。
(2) 121℃压力蒸气**化学指示卡。
(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压**20分钟后备用。
(4)O—150℃留点温度计。
2.方法与结果
将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片(以下简称菌片)用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压**器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如**器为二层,则需放10处。
留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前,需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存l℃之间,则说明**器内的温度分布是均匀的。
**后的菌片应在严格无菌操作条件下放入**后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时,观察颜色变化。如培养基变为黄色,说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活,**仍可在培养基中生长,分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色,则说明芽胞已灭活。同时要用未经**的纸片放入培养基内作为阳性对照,不加纸片的空白培养基作为阴性对照。
化学指示卡上的指示色块,在高压蒸气**时,由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅,并与对照色相比,可判断**效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色,影响**效果的观测。
高压蒸气**必须使蒸气顺利进入**器内,与**物品接触,并将原有的冷空气排出方可达到**的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次,共做六次。
5个点六次试验表明温度均在121℃,化学指示卡变黑;程度与对照色一致;培养基均未改变颜色,说明高压蒸气**效果合格。
高压**器属于强检仪器,但强检只是对仪器物理参数的考核。所以做过强检的**器还必须进行**效果的验证。一些单位常常忽略了这个重要的问题。国内市售的手提**器,往往仪器指针达到所需的温度,但**物品的实际温度却未达到要求。导致**物品不彻底,影响实验结果。培养基**不彻底,影响培养基的使用及结果判断。因此高压蒸气**器无菌效果的验证是一个必须引起重视的问题。
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