摘要：紫云英蜜色泽为浅琥珀色，结晶颗粒白色细腻；具有大自然清新宜人的草香味，甜而不腻，鲜洁清甜为一等蜜，深受国内外市场欢迎。
目的建立接骨胶囊中阿魏酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法，色谱柱：HypersilC18（4.6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-1%冰乙酸（33∶67），检测波长为320nm，流速为1.0mL/min。结果阿魏酸在0.12～1.2μg范围内呈良好的线性关系（r＝0.9999），平均回收率为99.6%，RSD＝1.8%。结论该方法简便、准确，可用于控制接骨胶囊制剂的质量。
接骨胶囊是在接骨片[《卫生部药品标准·中药成方制剂》（第2册）WS3-B-0402-90]的基础上研制的新制剂，由**铜粉、川芎、制川乌、当归、乳香（醋炙）、没药（醋炙）、自然铜（煅）7味中药组成，具有散瘀、**、止痛的功效，临床用于跌打损伤、筋伤骨折、瘀血肿痛。阿魏酸为本品有效成分之一，且含量较高。本试验采用高效液相色谱法对接骨胶囊中的阿魏酸进行了含量测定，为控制本品的质量提供依据。
1仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪LC-6A系列；LC-6A溶剂输送泵；SPD-6AV紫外-可见分光检测器；NASTA色谱工作站；7125型定量进样阀。接骨胶囊（自制，规格：0.2g/粒，批号070810、070812、070814）；阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号110773-9910）。甲醇为色谱纯，醋酸为分析纯，水为重蒸水。
2方法与结果
2.1色谱条件与系统适用性试验
HypersilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-1%冰乙酸（33∶67，v/v）；检测波长：320nm；柱温：30℃；流速：1.0mL/min。在此条件下，阿魏酸与其他组份分离度大于1.5，按阿魏酸峰计算理论塔板数不低于2000，色谱峰的对称因子为0.95～1.05。
2.2溶液制备
2.2.1对照品溶液的制备
取阿魏酸对照品适量，精密称定，用甲醇配成每1mL含0.06mg的溶液。
2.2.2供试品溶液的制备
取接骨胶囊50粒，取研细内容物约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水（50∶50，v/v）25mL，密塞，称定重量，超声处理（功率200W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇-水（50∶50，v/v）补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.3阴性对照溶液的制备
按照**比例和制备工艺，制备不含川芎和当归的阴性模拟制剂，照“2.2.2”项下方法制备阴性对照溶液。
2.3分析方法验证
2.3.1专属性考察
取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液，在上述色谱条件下进样20μL，记录色谱图，结果见图1。由色谱图知，阿魏酸峰保留时间约15.6min，阴性对照样品溶液在阿魏酸峰位置无干扰峰，阿魏酸与其他组份可完全分离。
2.3.2标准曲线制备
精密吸取阿魏酸对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、10.0mL，分别置10mL棕色量瓶中，加甲醇-水（50∶50，v/v）稀释至刻度，摇匀，各进样20μL，按上述色谱条件进行测定。以阿魏酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，计算得回归方程：Y＝82824X－560.95，r＝0.9999，表明阿魏酸在0.12～1.2μg范围内线性关系良好。
2.3.3精密度试验
精密吸取阿魏酸对照品溶液2.0mL，置10mL棕色量瓶中，加甲醇-水（50∶50，v/v）稀释至刻度，摇匀，进样20μL，重复进样5次，按上述色谱条件进行测定，结果阿魏酸峰面积RSD＝1.1%。
2.3.4重复性试验
取同一批样品（批号070810）约2g，精密称定，共5份，按“2.2.2”项下方法操作，测定结果的RSD＝1.7%。
2.3.5稳定性试验
取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、24h，精密吸取20μL，注入液相色谱仪，测定阿魏酸峰面积，RSD＝1.6%，说明供试品溶液在24h内基本稳定。
2.3.6加样回收率试验
取已知含量的样品（批号070810）约1g，精密称定，共9份，分别加入1.5、3.0、4.5mL阿魏酸对照品溶液，按“2.2.2”项下方法操作，按上述色谱条件测定，结果见表1。表1接骨胶囊中阿魏酸的加样回收率试验结果（略）
2.4样品测定
精密吸取供试品溶液20μL，按上述色谱条件测定，3批样品测定结果见表2。表23批样品的阿魏酸含量测定结果（略）
3讨论
样品提取方法及条件考察[1-2]分别采用甲醇-水（50∶50，v/v）、甲醇、流动相为溶剂，分别超声提取15、30、60min，比较阿魏酸的含量，结果表明，样品用甲醇-水（50∶50，v/v）超声提取30min较为适宜。另外，本试验曾用甲醇-水（50∶50，v/v）加热回流，结果阿魏酸含量与超声提取30min比较没有明显提高，但因加热回流操作繁琐，故采用超声提取为样品提取方法。
您可能会对本公司的以下产品感兴趣：
索氏提取器∣定氮仪∣全自动凯氏定氮仪∣pH计∣索氏提取器∣索氏抽提器∣索氏抽提仪∣蛋白质测定仪∣马弗炉∣可见分光光度计∣紫外可见分光光度计∣火焰分光光度计∣水分测定仪∣水份测定仪∣火焰光度计∣电子天平∣旋转蒸发器∣索氏提取仪∣超级恒温槽∣低温恒温槽∣分光光度计∣电导率测定仪∣旋转式粘度计∣氮磷钙测定仪∣白度测定仪∣旋光仪∣白度仪∣紫外分光光度计∣旋转蒸发仪∣纤维素测定仪∣箱式电阻炉∣凯氏定氮仪∣脂肪测定仪∣粗纤维测定仪∣快速水分测定仪∣消化炉∣水分快速测定仪∣凯式定氮仪∣罗维朋比色计∣马福炉∣粉碎机∣脂肪测定仪∣全自动凯式定氮仪∣水份快速测定仪∣消煮炉∣快速水份测定仪∣粗纤维测定仪∣酸度计∣粗脂肪测定仪∣全自动定氮仪
