miRNA靶基因验证

达为科优势：

    采用化学合成的miRNA mimics，亦可构建pri-miRNA表达载体萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶对应不同的反应底物，反应中没有的交叉干扰。

原理

    当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后，主要抑制mRNA的翻译，可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对标靶mRNA的降解，可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法，都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测。将miRNA靶基因的3’UTR克隆到含双荧光素酶报告基因载体的荧光素酶基因下游。如果miRNA与克隆的3’UTR靶标相互作用，通过测定两种荧光素酶的活性比值可以获得miRNA对靶标调控作用的结果。方便简单地应用于miRNA与基因的检测、全基因组范围内miRNA对基因的检测和阳性作用位点的突变检测。