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我们可能会记得孩提时代，用显微镜看草履虫的样子。现在，利用共聚焦显微镜或其他活细胞成像仪器，人们已经可以看单个细胞的器官，能看到远比鞭毛的拍打更细微的东西，着实令人兴奋。目前，研究活细胞的工作人员正从事跟运动、生理过程有关的单个分子的定位和相互作用的研究。这一结果扩展了仪器和试剂市场的发展。
活细胞成像的发展可能是生命科学自然进化的一部分。该领域很久前就认识到细胞是生命的结构和功能单位。后来，科学家发现了基因密码、核算和基因特性、特定蛋白。但下一个问题是：他们怎么工作？活细胞成像为此提供了新的线索。
"在活细胞成像前，我们做了生化分析和沉淀反应测定以确认变异的蛋白"，维多利亚大学的药学和细胞生物学助理教授Richard N. Day说，“通过活细胞成像，我们可以对变异蛋白在细胞核中定位”。这些资料对于研究**的发展和设计有效**方案非常关键。例如，Day和他的研究小组通过活细胞观察发现了变异基因如何导致垂体***缺乏症的发生。
我们能看到各种品牌共聚焦显微镜的灵活性，这种仪器已被发明50年，是活细胞成像系统中*好的仪器。有一个针孔，挡住杂散光线。因为只有焦平面的信号被采集，所以得到的图像非常锐利，分辨率很高。其扫描单元使显微镜能对显微镜做光学切片，这样能研究较厚的样品。同时通过软件，将不同层的光学切片合成样品的三维图像。
在确保基础应用的情况下，目前行业内*新的仪器都可用来做活细胞成像，“行业正面临一个巨大的改变，从点扫描的传统共聚焦显微镜到多细胞友好的显微镜”，PerkinElmer公司的PaulOrange说，做为公司活细胞成像的产品***，Orange认为早期的活细胞成像系统常因细胞毒性不太适用。长时间的光照会产生光漂白，这样荧光探针不能再激发出荧光。这种现象阻碍了样品的长时间观察、成像。
目前有方法能减少样品在光下的照射，如碟片共聚焦，它阻碍了长时间的曝光。设备内有多个针孔，光在瞬间照射样品。“就像日光浴，长时间暴露在少量阳光下会晒成漂亮的褐色，而强光下短时间内就会晒伤。”Orange 说。另外，这个系统还可以只照亮样品的特定位置和各种形状的样品。这个特点不仅保护样品，它还使研究者能专门漂白某些位置。
这样机器就可以检测进入漂白区域的任何分子。“这在活细胞成像中至关重要，”MDC公司的 Handran 说，“我们可以看到标记蛋白进入漂白区域，这样可以进行蛋白动态学研究”。
“观察活细胞也面对很多其他挑战”，Nikon的应用专家Jennifer L.Peters博士说：“活细胞一直在动，而这常常没什么价值”。
长时间观察活细胞的系统要求配有湿度、温度和二氧化碳等培养系统。因此，各公司的成像装置上配有培养箱类似的系统，允许长时间观察。例如Nikon的BioStationCT,样品一直待在培养箱中，机械手帮助运输样品从培养室到载物台。
*受欢迎的改进可能是系统的方便性，科学家想要更多的集中在研究上而不是复杂的仪器设置，从盒外操作到预置程序化的模块设置，再到完全整合好的系统，一步到位，这样活细胞成像系统的市场也到了它的黄金时段。
原文链接：Laura Lane（原文作者）
http://www.biocompare.com/Articles/TechnologySpotlight/868/Live-Cell-Imaging-Hits-Prime-Time.html