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光学显微镜下的细胞
光学显微镜细胞化学是利用特异的化学或生化反应在电镜下对细胞的化学成份进行定性与定位分析的方法.电镜细胞化学是在光镜细胞化学基础上发展起来的。形态所不同的是,电镜细胞化学反应的结果必须在所研究的化学成份的部位引起电子密度的改变,形态这是由电镜的成像原理所决定的。根据造成细胞中电子密度变化的原因、光学显微镜可将电镜细胞化学方法分为二类:
1.反应产物是不溶解的并且是高电子密度的。光学显微镜例如在固定剂中加入草酸钠,能将细胞内的钙离子变为草酸钙沉淀下来,并在电镜下显示为 高电子密度。
用30写甘油一0. 155M醋酸按(形态挥发性盐)冲洗云母表面,光学显微镜吸干。在真空10-STorr, 1小时,除去甘油、喷碳。
漂浮出碳膜和吸附的质膜在双蒸水表面.
用载网捞膜,吸干.光学显微镜用2%醋酸铀,或相酸按、形态磷钨酸钠一滴滴在石蜡板表面,将载网倾斜铲起负染液滴。
尼康显微镜用滤纸吸干多余的染液,室温干燥.此法可观察质膜原位骨架,形态也可做细胞骨架胶体金或铁蛋白标记。
2.反应产物是不溶解的,光学显微镜经过电镜样品制备中的常规饿酸固定可变为高电子密度的。例如DAB可被细胞色素氧化酶所氧化而形成沉淀,并可被俄化,光学显微镜用于显示酶所在部位。
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