下肢缺血（血管再生）实验方案
下肢缺血试验应用
血管新生是缺血性心血管**血流阻塞后改善血流灌注的重要机制。然而,目前临床上尚缺乏一种简单、无创和特异的直接评价血管新生的方法。下肢缺血试验是进行血管新生评价的重要试验。方法是使用大鼠或小鼠予结扎一侧下肢股动脉制备下肢缺血模型,另一侧下肢作为对照组。术后使用激光多普勒血流成像仪对双后肢进行扫描成像，分析后肢血流量。然后每周对双后肢进行扫描成像，分析后肢血流恢复状况。
下肢缺血试验是进行缺血性心血管病与**性血管新生研究的重要方法，可以将促血管新生因子注入体内，促进缺血局部血管新生与侧支循环，改善组织的血液供应与功能，进而评价促血管新生因子的作用。促血管新生因子可以是促血管新生**、蛋白、基因和干细胞**。
除心脏血管**研究外，还可使用下肢缺血试验评价糖尿病、外周血管**、伤口**等方面的血管新生研究。
所需设备
MoorLDI2-HIR点扫描激光多普勒血流成像（Gene&I，北京） AMG小动物麻醉机（Gene&I，北京）
剃毛刀和脱毛膏
试验过程
将大鼠或小鼠使用麻醉机进行麻醉。
将后肢使用脱毛膏进行脱毛处理。
剪开其中一侧后肢皮肤，分离肌肉分离出股动脉。
使用缝合线在紧贴腹股沟处对股动脉进行结扎。
缝合伤口，使用激光多普勒扫描仪对双下肢进行血流扫描成像。
分析缺血侧下肢与正常侧血流灌注量对比。
试验结果
手术后当天，缺血侧肢体相对于正常侧缺血率可达80-90%。
在使用促血管新生因子后，可观察到缺血侧肢体血流恢复过程。
Reference
Aicher A.,
Heeschen C., Sasaki K., Urbich C., Zeiher A. M., Dimmeler S. 2006
Low-energy
shock wave for enhancing recruitment of endothelial progenitor cells: a new
modality to increase efficacy of cell therapy in chronic hind limb ischemia.
Circulation,
114 (25), pp 2823-30
Chalothorn D,
Zhang H, Clayton J. A, Thomas S. A, Faber J. E, 2005.
Catecholamines
augment collateral vessel growth and angiogenesis in hindlimb ischemia.
American
Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology Published 1 August
2005 Vol. 289 no. 2, H947-H959.
Crawford R.
S., Albadawi H., Atkins M. D., Jones J. E., Yoo H. J., Conrad M. F., Austen Jr
W. G., Watkins M. T. 2010
Postischemic
poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibition reduces ischemia reperfusion
injury in a hind-limb ischemia model.
Surgery, 148
(1), pp 110 - 118
Tritsaris K.,
Myren M., Ditlev S. B., Hübschmann M. V., van der Blom I., Hansen A. J., Olsen
U. B., Cao R. , Zhang J., Jia T., Wahlberg E., Dissing S., Cao Y. 2007
L-20 is an
arteriogenic cytokine that remodels collateral networks and improves functions
of ischemic hind limbs.
Proc Natl
AcadSci U S A.104 (39), pp 15364-9
Turgeon J.,
Dussault S., Haddad P., Groleau J., Ménard C, Michaud S. E., Maingrette F.,
Rivard A. 2010
Probucol and
antioxidant vitamins rescue ischemia-induced neovascularization …���…. exposed to
cigarette smoke: Potential role of endothelial progenitor cells.
Atherosclerosis
208, spp 342–349
吉安得尔下肢缺血国内合作单位
**医学科学院6所
复旦大学基础医学院
华东师范大学
北京大学医学部
中科院生物物理所
四川大学华西再生医学研究中心
四川医科大学