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液相色谱测定保健食品中L－谷氨酰胺含量的方法
1 试剂

1.1乙腈色谱纯。

1.2磷酸二氢钾分析纯。

1.3L－谷氨酰胺标准溶液准确称量L－谷氨酰标准品0.050g，加入检测用流动相并定容至250mL。此溶液每mL含1mgL－谷氨酰胺。

2仪器设备

2.1高效液相色谱仪：附紫外检测器（UV）。

2.2超声波清洗器。

2.3离心机。

3分析步骤

3.1样品处理：准确称取一定量片剂粉末或胶囊内容物于试管中，加入流动相100mL，使浓度为每毫升中大约含L－谷氨酰胺10mg。超声提取5min后以3000rpm/min离心3min。经0.45μm滤膜过滤后待进样。

3.2液相色谱参考条件

3.2.1色谱柱：μ－BONDAPAKTMC184.6×250mm。

3.2.2柱温：室温。

3.2.3紫外检测器：检测波长220nm。

3.2.4流动相：乙腈：水：磷酸二氢钾=200mL：800mL：2g。

3.2.5流速：0.8mL/min。

3.2.6进样量：10μL。

3.2.7色谱分析：量取10μL标准溶液及样品溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或基线构成之面积称峰面积。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064Wh/2h>峰面积与标准比较定量。

4结果

4.1计算

式中：X－样品中L－谷酰胺的含量，mg/g；

h1－样品峰高或峰面积；

C－标准溶液浓度，mg/mL；

V－样品定容体积，mL；

h2－标准溶液峰高或峰面积。

m－试样量，g。

4.2精密度和准确度

对本方法进行精密度和准确度试验，方法的回收率在96.6%~99.8%之间，相对相差≤3%。

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