超声法在革兰氏菌破壁的应用

超声法在革兰氏菌破壁的应用

革兰氏菌细胞壁较厚，而且有大量特殊组份磷壁酸，破壁难度很大；革兰氏菌核酸分析、蛋白分析在生物医药领域又有着重要意义，所以破壁的方法选择就尤为重要，在能保证破壁的高产率基础上，又能实现所需胞内物质的高回收率，才是*佳选择。超声法由于自身优势在革兰氏菌破壁中得到广泛应用。

可以用于革兰氏菌破壁的方法主要有：

1.研磨法，可用的研磨剂有氧化铝、玻璃珠、玻璃粉等。可以手动在研钵里磨，也可以研磨机。原理是：在**悬液中加入研磨剂，研磨时研磨剂颗粒碰撞而破碎细胞。

2.超声法，使用超声波细胞破碎仪，原理是：利用超声波对细胞内所产生的空穴作用破菌，同时超声过程产生的漩涡对菌体也有剪切力，有助于破菌。

3.压力法，原理是：细胞悬液以极快的速度撞击静止面，使菌体破碎。工业生产中应用较多。

4.渗透法，将悬液与高渗透压液体中平衡，再转移至低渗透压液体中，此时大量水分渗入细胞，使细胞破裂。只适合于胞壁较弱的革兰氏阴性菌。可以和其他方法联合使用。

5.冻融法, 原理是：细胞内胞液冻结时产生冰晶，体积增大，撑破菌体。

6.酶解法，分为菌体自溶和溶菌酶两种方法。

超声法优势：相比于其他处理方法，超声法可以更快的完成工作，且相对方便控温。超声法可实现极高的破碎率，节约样品，减少重复次数。也能有效保留胞内物质的完整性，方便进行下一步研究。

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