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样品前处理方式--使用冷冻研磨机于少量样品研磨及优缺点

样品前处理方式--使用冷冻研磨机于少量样品研磨及优缺点

----北京星越生物科技有限公司

BRANSON（必能信）超声破碎产品

少量样品处理的回收率对一般的杵和硏砵是个挑战，100mg或甚至更少的样品会如一层粉末覆盖在硏砵上并很难回收。冷冻研磨机提供了另一个选择。冷冻研磨机本质上为一个微型杵臼，可用在非常少量的样品，达到了样品前处理所要求的结果。小型且紧密安装的杵含有少量的样品，可以让研磨后的收集更加有效。冷冻研磨机使用与标准杵臼研磨相似，于冷冻研磨机使用时，冷冻研磨机需先冷却，接着将样品加入。**个主要不同的地方在于冷冻研磨机的力量是来自手持自动螺丝起子。这样操作很麻烦，可考虑超声波破碎仪来进行。

准备进行化学溶解或机械加工的样品的程序中，样品前处理**步很适合使用低温研磨。其确实能让样品从大型固体研磨成小的微粒且不会输入大量的热能。样品以较小的微粒尺寸可快速的溶解，如RNA隔离，使用变性溶剂或离液剂(chaotropes)。使用低温研磨机或杵臼执行低温研磨效率约可达到大部分一次性破坏方法的一半，*有效的两阶段步骤的29%。然而，与杵臼相比，冷冻研磨机确实可以产生比酵素释放研究而更小的微粒。

使用冷冻研磨机进行样品前处理的肌肉所释放的相对酵素活性

冷冻研磨肌肉细胞确实减少样品尺寸，但样品前处理的均质效果明显下降，效能为30%。

优点-冷冻研磨机处理少量的冷冻样品前处理更加有效率。冷冻研磨机与杵臼研磨样品都很有效率，但研究使用两种方法均质肌肉组织的酵素分析指出，使用冷冻研磨机的方式会得到较好的酵素活性，即较小的微粒。加入萃取缓冲液，小的微粒会更迅速的溶解。另一个优点是系统是机动的，可以不另外费力的处理更多的样品。

限制-冷冻研磨机仅能处理少量的样品(100 mg或更少)，如此才能让杵跟硏砵更有效的研磨。杵的尺寸也小，且必须保持在储存桶内，例如制冷机(CryoCooler)，使他们保持在低温状态。

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