大肠杆菌是超声波破碎仪相对容易破碎的样品，通常大家都是破碎液离心后，取上清和沉淀分别用SDS-PAGE检测，考染后，查看蛋白条带，但很多人会发现没有条带？这种情况就要检查破碎前的样品是否正常、超声是否满足、电泳仪是否正常等等多个问题，这个单独说一下采用必能信超声波破碎仪这个步骤破碎大肠杆菌需要注意什么，希望能给您带来帮助。

1、 样品量体积、浓度是否合适？

体积过小的情况下（如1ml以下），需要考虑非接触式超声方式，接触式超声方式在如此小量情况下，探头无法到达液面足够距离，导致超声能量无法足够释放，破碎效果受影响，而非接触式方式就不用有此担心。

菌液取得太少，PBS的量太大，导致浓度太低，也无法收集足够的蛋白，一般摇瓶培养的菌，100ml菌液对应的破菌液为10-20ml。

2、 样品是否真正控温？

由于超声释放能量的同时，还会释放大量的热，由此蛋白很容易变性，可选用冰浴法或冷却循环水方式控温，超声波破碎仪也应选择电能输入低，转换效率高的品牌，转换效率低的破碎仪，会产生额外大量热能，可能会导致以上控温方式失效。

3、 如何降低泡沫的产生？

产生泡沫的同时，超声也就失去意义了，不仅无法正常释放能量，还会过载停机，损伤探头。想要降低泡沫产生，探头需要尽量深入到样品底部，如依然效果不佳，在不能调整样品量的情况下，可选用非接触式超声方式，如可增加样品量，问题就迎刃而解。

所以，选择一款适合的超声波破碎仪尤为重要，不仅要在较低电能输入下，既能完成样品破碎，又能有效减少额外热量产生。

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