一种新型的简易蛋白芯片

一说起蛋白芯片，大家会立马想到大阵势，点样、杂交、检测，每一步似乎都是费时费力，还费钱。其实不然，R&D Systems就推出一种不需要任何特殊仪器的新型蛋白芯片-Proteome Profiler抗体阵列，6小时内*多能检测59种蛋白。

作为一种快速、灵敏而又经济的工具，ProteomeProfiler抗体阵列能同时检测单个样品中多种分析物的相对水平。这些阵列的使用不需要任何特殊的仪器，也取代了多次**沉淀/Western blot实验。每个阵列在设计时都利用了精心挑选的捕获抗体，它们在硝酸纤维素膜上重复点样两次。

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下面以Proteome Profiler Phospho-RTKAntibody Array为例，介绍其操作步骤，其实就相当于多个Westernblot集中在一张膜上。高度特异的捕获抗体点样在NC膜上（STEP1）。捕获抗体识别磷酸化和非磷酸化受体酪氨酸激酶（RTK）的胞外结构域，随后HRP结合的anti-Phospho-Tyrosine抗体特异检测磷酸化的RTK（STEP2）。之后，利用化学发光检测试剂来检测蛋白，产生的信号与结合的分析物呈正比。

美国DanaFarber癌症研究所和哈佛医学院的研究人员就曾利用Phospho-RTK AntibodyArray来鉴定脑部肿瘤多形性胶质母细胞瘤（GBM）中磷酸化的RTK，以确定为什么针对单个RTK的肿瘤疗法总是失败。他们发现，在GBM细胞系和原代GBM，以及其他实体瘤比如肺和胰腺癌细胞类型中，不是一个，而是几个RTK都激活了。即使在血清饥饿和肿瘤细胞移植的条件下，大部分磷酸化的RTK仍然激活，表明RTK磷酸化不可能是由培养基中的因子诱导的。更重要的是，此研究发现同时靶点多个RTK能抑制神经胶质瘤细胞中的癌症表型。

这些研究显示，抗体阵列能简化鉴定蛋白所需的筛选过程。通过监控蛋白水平和一些蛋白翻译后修饰的变化，能迅速靶定目标分子，以便进一步的研究。除了Phospho-RTK和Phospho-MAPK试剂盒，R&DSystems还提供了另一些与癌症相关的抗体阵列，比如血管生成和凋亡。下表列出了目前所有的抗体阵列试剂盒。在用蛋白芯片进行筛选之后，你还可以用R&DSystems可靠的Quantikine ELISA试剂盒来量化你的结果，而更多的抗体和蛋白可为实验提供更丰富的资源。（生物通余亮）

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