Oligo转染 反义寡核苷酸一度曾经是制药领域的希望之光。Oligo的转染还是属于DNA转染，由于分子小，转染的主要问题是转染后的稳定性。2'-O-methyloligoribonucleotides比一般的Oligo稳定，硫代S-Oligo可以抗拒核酸酶的降解但不可以磷酸化，如何选择就要根据实验目的而定了。 我们终于结束了转染这一部分。希望对你有所帮助。*后我们再顺带介绍通常在转染时遇到问题该如何面对——毕竟不同的细胞和不同的实验目的，遇到困难往往是难于预料的，所以无论前人是否已经为你提供了现成的方法，如果是除初次尝试某种试剂或者某种细胞系，这几个对照是一定要做的：空白对照，只加一定量核酸的对照，只加一定量转染试剂的对照，2个以上不同的量比实验，对于检查问题是非常有用的。转染效率低：可能的原因：
转染试剂不适合（比如空白对照的细胞存活率就低等等）
转染试剂和核酸或者蛋白的量不够，或者比例不对（自行调整咯，别告诉我你不会）
基因表达时间（检测时间）有问题（孵育更长时间吧，如果没有毒性问题的化，如果毒性也随转染效率提高，那就要缩小孵育时间拉）
副作用（比如目的基因的毒性）（换诱导型启动子吧）
核酸或者蛋白质量问题（重做纯化实验）
报告基因或者检测系统的问题
细胞死亡率高：
过量的转染试剂或者转染复合物（减少用量或者减少孵育时间，转染后洗细胞）
细胞问题（重新复苏活化一个细胞株，或者重新传代）
目的基因毒性（减少用量）
转染效率重复性差：
细胞汇合度不同（保证同样的接种量同样的时间）
支原体污染（杀了它吧，重新复苏一管新的）
细胞传代次数太高了（重新复苏一管新的细胞）
血清质量不稳定（一次囤积同一批号的血清吧）