说到成像系统,你脑子里*早闪现的也许不是Bio-Rad,那是因为你还不了解它的名头。要知道,Bio-Rad的成像分析系统从2004年到2008年,曾连续5年获得美国生命科学产业(LSIA)的成像分析系统大奖。它就像核酸纯化领域的QIAGEN和细胞培养领域的Gibco,那可是成像领域的**啊。不过,这些成像仪却始终不如Bio-Rad的电泳系统那样深入人心。我想还是因为大家了解不多吧,那么就让生物通来带你认识一下Bio-Rad的**成像家族。
随着生物分析的多样化,成像仪的功能也是越来越多,往往集比色法、荧光、化学发光、同位素检测于一身,这样反而搞得我们有点不知所措,在选择仪器时无法下手。幸好,Bio-Rad有这样一份选择指南,列出了多种应用,并打出了每种仪器在此应用中的分数,从1到5,当然越高越好。你只需要找到你的主要用途,选择相对高分的那一款就可以啦,也不必深究那些繁冗的仪器参数,搞得一个头两个大。
荧光分析
荧光分析的应用是越来越广泛,核酸染料、蛋白染料以及蛋白质组学研究中的糖基化和磷酸化蛋白分析都离不开五彩斑斓的荧光。如果你们实验室也是以此类应用居多,那么你仔细瞅瞅上面的选择指南,只要是与荧光沾上边的,PharosFx分子成像系统都一定会是*高分-5分。
PharosFX系统应用多通道激光器来增加应用的灵活性。内置和外置的激光器选择可以激发单色或者多色荧光,并对绝大多数荧光染料或者标记进行检测,其中包括EB、SYBRGreen I、SYBR Gold、SYPRO Orange、SYPRO Red、Nile Red、SYPRO Ruby、DeepPurple、Alexa Fluor 488, 532, 546,635、FITC、FAM、Cy2、Cy3、Cy5、HEX、R6G、TAMRA、Texas Red、Pro-Q Diamond 和Pro-Q Emerald等。
PharosFx成像系统已经预先安装好了数个发射光滤光片,可以对多种染料进行组合检测。当然,如果这些滤光片还不够,你也可以在PharosFX上安装定制的滤光片来进行特殊荧光的检测。系统内置了一个532nm的激光器,你还能选择增加一个外置激光模块(488nm和635nm两种)来增加应用的多样性。
所有的激光器和滤光片的组合都由QuantityOne控制分析软件来控制。只要简单地在软件中选择仪器,它将自动地配置*佳的硬件(包括激光器和滤光片)组合。你也可以自定义应用设置并利用定制的滤光片对特殊荧光探针进行检测。
如果你在荧光之外,偶尔还会进行同位素检测,那么你可以选择PharosFX系统的同胞兄弟-PharosFXPlus系统。它在其他方面与PharosFX完全相同,只是多了一项同位素检测功能。PharosFXPlus系统的磷屏技术提供*佳的检测灵敏度,其曝光时间一般仅为感光片1/10,定量**度更高。该磷屏可以与Bio-Rad的磷屏夹或者放射自显影胶片夹配合使用。同时也兼容其它厂家的磷屏。
化学发光
Bio-Rad的化学发光成像系统历史悠久,从ChemiDoc到ChemiDocEQ到ChemiDocXRS再到*新的ChemiDocXRS+,一路走来,-成像系统在研究人员的建议不断更新和完善。
ChemiDoc XRS+ 成像系统是Bio–Rad凝胶成像系列中*先进的化学发光检测系统,提供更高的分辨率和灵敏度。系统采用平场扫描技术以获取**的均一性及定量性能,并可灵活地成像化学发光、荧光和比色样品。系统包含一个超灵敏、**温度-30℃的12位CCD,能更好地检测微弱样品。
ChemiDoc XRS适于要求高分辨率(双向凝胶电泳)和高灵敏度(化学发光western杂交)的广泛应用。它比传统的压片扫描更快速简便,且拥有更广的动态范围。配合Bio-Rad化学发光试剂盒WesternC,检测灵敏度可达fg级,信号持续24小时,能达到更好的样品检测灵敏度。该试剂盒可常温保存1年。
如果你还想进一步了解ChemiDocXRS成像系统,可以参考此位同学的《高灵敏度化学发光仪ChemiDoc XRS应用心得》。
全能王
纵览全表,你会发现有一种成像系统的综合得分*高,那就是VersaDocMP 4000。除了放射性同位素无法使用,其余应用悉数覆盖,且为4-5的高分,当之无愧成为“全能王”。
VersaDoc 成像系统采用Peltier冷却的高分辨率数字CCD技术,并结合了独特的宽波长紫外激发光源及高效的光学设计,能提供**的灵敏度、均一性、灵活性及动态范围,在性能表现上可与更昂贵的以激光为基础的技术相媲美。它们拥有8个发射滤光片位置,可有效地多通道检测标准品及未知样品。VersaDocMP 4000还有一个近亲-MP5000。4000型提供*好的分辨率,5000型则提供了*高的灵敏度,更适合于化学发光的Western分析。所有2种型号均包含QuantityOne 软件,以进行快速图像采集和定量分析。
VersaDoc成像系统的应用非常广泛,普通的看胶自不必说,它能对各种染色或标记的核酸进行检测和定量,包括GelStar、EB、FITC、SYBRGreen、SYBR Gold及德克萨斯红。DNA 染色的灵敏度为pg 级,末端标记DNA为fmol。它还能对各种染色或标记的蛋白进行检测和定量,包括考马斯亮蓝、铜染色剂、SYPRO Ruby、SYPRORed等等。此外,化学发光、化学荧光、比色和荧光等的印迹杂交分析也是它的强项。它还能检测和定量其它荧光分子,包括Cy2、Cy3、GFP及罗丹明。
新成员
去年,Bio-Rad**成像家族还迎来了一位新成员-无染料凝胶成像系统,并一举获得了生物通举办的“2008年度十大**产品大奖”。它的主要部件有两个:Criterion预制胶,Criterion无染料成像仪。当然,为了分析结果,你还需要电脑和软件。Criterion预制胶可不是一般的预制胶,估计是含有三氯化合物,所以不能拿平时用的预制胶来代替。样品制备及电泳步骤与普通的电泳一样。电泳之后,取出凝胶,放置在Criterion无染料成像仪中。分离的蛋白通过UV照射而激活,产生荧光,从而被CCD照相机捕获。2.5-5分钟后,蛋白的图像就出来了,软件还会根据蛋白Marker,自动估算每个蛋白条带的分子量和数量,超级省心。再也不用和考马斯亮蓝打交道了,再也不用坐等染色和脱色啦,真是方便至极。