**组化染色技术服务

应用**学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究。

1、石蜡切片脱蜡至水。
2、3%H2O2室温孵育5~10 分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。
3、蒸馏水冲洗，PBS 浸泡5 分钟，(如需采用抗原修复，可在此步后进行)。
4、5~10％正常山羊血清（PBS 稀释）封闭，室温孵育10 分钟。倾去血清，勿洗，滴加5、5、适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗，5 分钟×3 次。
7、滴加适当比例稀释的生物素标记二抗（1%BSA-PBS 稀释），37℃孵育10~30 分钟；或8、加**代生物素标记二抗工作液，37℃或室温孵育10~30 分钟。
9、PBS 冲洗，5 分钟×3 次。
10、滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素（PBS 稀释），37℃孵育10~30 分钟；或**代辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃或室温孵育10~30 分钟。
11、PBS 冲洗，5 分钟×3 次。
12、显色剂显色（DAB 或AEC）。
13、自来水充分冲洗，复染，封片。

1、必须彻底抑制内源性过氧化物酶的活性，才能降低背景的染色。

2、须适当合理地使用封闭试剂。

3、选择合适的孵育时间。

4、连接抗体的选用必须正确，否则可造成假阴性的现象。

5、切片脱蜡必须干净，否则将会影响**组化染色的*后结果。