实时定量PCR ( mRNA 和 microRNA )
代做实验,实时定量PCR,实验外包,技术服务详细描述
拜沃生物为您提供miRNA 实时定量PCR技术服务，您只需要提供保存完好的组织或细胞标本，本公司的技术服务人员就可替您完成miRNA实时定量PCR实验操作和数据分析，提供给您完整的实验报告，为您节省大量的时间和精力。
拜沃生物miRNA实时定量PCR技术服务流程如下：
1.Oligos设计、合成
合成需要检测的miRNA的RT引物、PCR引物和检测用荧光探针，并合成该miRNA相应的DNA寡核苷酸作为标准。
2.样品RNA抽提
a.实验对象为组织样品，取适量（50～100mg）新鲜组织或正确保存的组织样品，匀浆后用PURELINKTM试剂抽提RNA。
b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，吸去PBS后用PURELINKTM试剂抽提RNA。
3.RNA质量检测
a.紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260nm和280nm的吸收值，以计算浓度并评估纯度。
b.用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA纯度及完整性。
注意：用于miRNA实时定量PCR检测的RNA样品，必须是高质量的，完整的，没有RNase 污染（降解的样品不能用于实时定量PCR检测），提取方法必须保证所得样品包含完整的小RNA部分。
4.逆转录合成cDNA
利用茎环引物逆转录合成cDNA**链。
5.实时定量PCR
以合成的cDNA作为模板进行实时定量PCR扩增，梯度稀释的标准同时进行实时定量PCR扩增，根据Ct值制备标准曲线。以同样的方法测定每个样品中U6 snRNA含量作为内参，校正上样误差。
6.分析结果、提供实验报告
分析实时定量PCR结果，根据标准曲线定量样品中的目的miRNA。提供实验报告，包括详细的实验方法，实时定量PCR实验数据和图表。
上海拜沃生物科技有限公司
联系电话：021－51262103，021－51262102
传真：021－51262103
网址：www.biovol.net 网址：www.elisabio.com
联系人：黄力，业务qq: 769201598
公司对外邮箱：，hyperheal@gmail.com
专业技术服务平台，生物科研基地！代做实验,实时定量PCR,实验外包
上海拜沃生物诚招国内实验服务代理经销商，实验项目：**组化，原位杂交，细胞凋亡，病理包埋，常规染色，WB和ELISA，PT-PCR实验，细胞培养，ShRNA服务。
整体实验代做，自有200平米实验室，欢迎咨询合作！2013年扩征国内各地紧密合作经销商，利润空间丰厚，有意者私聊。